基于上呼吸道黏膜免疫探討解表方治療表證的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：急性上呼吸道感染(上感)是常見(jiàn)的呼吸道傳染病，上呼吸道黏膜免疫功能低下是上感反復(fù)發(fā)作的重要原因之一，目前的臨床治療措施尚難從根本上解決上感反復(fù)發(fā)作的問(wèn)題。根據(jù)上感的臨床癥狀特點(diǎn)，中醫(yī)將其歸為“表證”的范疇，辨證采用辛溫解表法、辛涼解表法和扶正解表法進(jìn)行干預(yù)取得較好的治療效果，然而幾種治法指導(dǎo)下應(yīng)用的解表方的作用及機(jī)制尚不清楚。本論文的研究，從調(diào)節(jié)上呼吸道黏膜免疫功能的角度入手，模擬人類急性上呼吸道感染疾病的基本特征，通過(guò)建立寒冷致

2、小鼠上呼吸道黏膜免疫功能低下模型，并采用鼻腔及腹腔接種乙型溶血性鏈球菌方法，結(jié)合體外抑菌實(shí)驗(yàn)，觀察幾種解表方的治療作用特點(diǎn)，以期揭示中醫(yī)解表法治療上感的科學(xué)內(nèi)涵。
　　 方法：
　　 1.解表方對(duì)小鼠上呼吸道黏膜免疫功能低下模型的影響
　　 將昆明種小鼠置于-20℃寒冷環(huán)境中，以小鼠的生存狀況、唾液中sIgA含量及溶菌酶活性作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，觀察不同時(shí)間點(diǎn)動(dòng)物的反應(yīng)情況，確定造模所需最適的寒冷時(shí)間，建立寒冷致小鼠上呼

3、吸道黏膜免疫功能低下模型；給予解表方，采用ELISA法檢測(cè)唾液中sIgA的含量，采用比濁法測(cè)定溶菌酶活性，評(píng)價(jià)解表方對(duì)該模型的影響。
　　 2.解表方對(duì)上呼吸道黏膜免疫功能低下合并鼻腔接種乙型溶血性鏈球菌小鼠的死亡保護(hù)作用
　　 建立小鼠上呼吸道黏膜免疫功能低下模型，給予模型小鼠鼻腔接種乙型溶血性鏈球菌，觀察解表方對(duì)模型小鼠的死亡保護(hù)作用。
　　 3.解表方對(duì)上呼吸道黏膜免疫功能低下模型小鼠鼻腔接種乙型溶血性鏈球

4、菌的影響
　　 確定最適細(xì)菌濃度及最適收集小鼠唾液樣本時(shí)間，以溶菌酶為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定最佳實(shí)驗(yàn)條件，給予解表方，采用ELISA法檢測(cè)唾液中sIgA的含量，比濁法測(cè)定溶菌酶活性，評(píng)價(jià)解表方對(duì)黏膜免疫的影響。
　　 4.解表方對(duì)上呼吸道黏膜免疫功能低下模型小鼠腹腔注射乙型溶血性鏈球菌的影響
　　 建立小鼠上呼吸道黏膜免疫功能低下模型，給予模型小鼠腹腔注射乙型溶血性鏈球菌，觀察動(dòng)物死亡情況，進(jìn)一步明確解表方的作用是否為通

5、過(guò)增強(qiáng)上呼吸道黏膜免疫功能而實(shí)現(xiàn)其治療作用。
　　 5.解表方的體外抑菌實(shí)驗(yàn)
　　 采用瓊脂平皿打孔法，了解四個(gè)解表方對(duì)乙型溶血性鏈球菌是否具有體外抑菌作用。
　　 結(jié)果：
　　 1.將小鼠置于-20℃寒冷環(huán)境中15min，能使小鼠唾液中sIgA含量和溶菌酶活性明顯低于正常組小鼠，可建立穩(wěn)定的小鼠上呼吸道黏膜免疫功能低下模型。麻黃湯可以提高上呼吸道黏膜免疫功能低下模型小鼠唾液中sIgA含量和溶菌酶活性；桂

6、枝湯和玉屏風(fēng)散僅能夠提高模型小鼠唾液中溶菌酶活性。
　　 2.麻黃湯和銀翹散對(duì)上呼吸道黏膜免疫低下合并鼻腔接種乙型溶血性鏈球菌的小鼠有生存保護(hù)作用。
　　 3.小鼠置于-20℃寒冷環(huán)境中15min，鼻腔接種200μl濃度為5×107CFU/ml的乙型溶血性鏈球菌，4小時(shí)后小鼠唾液中溶菌酶活性明顯低于正常組；辛溫解表方麻黃湯能提高模型小鼠唾液中sIgA含量。
　　 4.幾種解表方對(duì)上呼吸道黏膜免疫功能低下小鼠腹腔注