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1、目的:評(píng)價(jià)低強(qiáng)度脈沖超聲波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)對(duì)鈦合金材料(Ti-6Al-4V),以下簡(jiǎn)稱Ti64,鈦合金表面修飾鈦酸鋇(barium titanate,BaTiO3)壓電陶瓷,以下簡(jiǎn)稱BT/Ti64,兩種材料上成骨細(xì)胞MC3T3-E1的影響。
方法:1、分組:將MC3T3-E1分別與BT/Ti64、Ti64支架材料復(fù)合培養(yǎng)。將兩種材料隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(UBT/Ti64、
2、UTi64)和對(duì)照組(CBT/Ti64、CTi64)。實(shí)驗(yàn)組接受20min/d低強(qiáng)度脈沖超聲波輻照,對(duì)照組接受20min/d不開功率的假輻照。2、超聲參數(shù):頻率:1MHz;強(qiáng)度:30mW/cm2;脈沖寬度:1ms;脈沖重復(fù)頻率:100Hz。3、掃描電鏡(scanning electron microscope,SEM)觀察MC3T3-E1在各組材料上的粘附狀態(tài)。4、劃痕實(shí)驗(yàn)(scratch test)評(píng)價(jià)LIPUS作用下BT/Ti64、
3、Ti64上MC3T3-E1遷移運(yùn)動(dòng)的水平。5、噻唑藍(lán)(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)評(píng)價(jià)LIPUS作用下BT/Ti64、Ti64上MC3T3-E1增殖的水平。6、堿性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)評(píng)價(jià)LIPUS作用下BT/Ti64、Ti64上MC3T3-E1分化的水平。7、骨鈣素(osteocalcin,OCN)評(píng)價(jià)LIPUS作用下BT/Ti64、Ti64上MC3T3-E1成
4、骨分化的水平。
結(jié)果:1、SEM結(jié)果:細(xì)胞接種4d后掃描電鏡觀察可見MC3T3-E1在各組材料上均伸展良好,呈長(zhǎng)梭型、多角形形態(tài),借偽足相互連接,可見分泌基質(zhì),BT/Ti64上的細(xì)胞密度要高于其基底材料,幾乎鋪滿材料表面。2、劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果:在第1d和第3d兩種材料超聲組的組織愈合率均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩材料比較,BT/Ti64的組織愈合率高于其基底材料,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在1d,BT/Ti64的壓電效應(yīng)為1.79。
5、3、MTT值:各組MTT值均隨時(shí)間增長(zhǎng)而增高。1、4、7d時(shí)兩種材料超聲組均高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。材料比較,1、4、7d時(shí),BT/Ti64都高于其基底材料,且在4、7d時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BT/Ti64的壓電效應(yīng)在1和7d分別是1.63和2.11。4、ALP值:各組ALP值均隨時(shí)間增長(zhǎng)而增高。1、4、7d時(shí)兩種材料超聲組均高于對(duì)照組,且4和7d時(shí),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。材料比較,在3個(gè)時(shí)間點(diǎn),BT/Ti64都高于其基底材料,差
6、異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BT/Ti64的壓電效應(yīng)在1、4和7d分別是1.14、3.91和1.95。5、OCN值:各組OCN值均隨時(shí)間增長(zhǎng)而增高。7、10、14d時(shí)兩種材料超聲組均高于對(duì)照組,且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。材料比較,在三個(gè)時(shí)間點(diǎn),BT/Ti64要高于其基底材料,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BT/Ti64壓電效應(yīng)在7和10d分別是1.66和1.1。
結(jié)論:1、LIPUS可以促進(jìn)MC3T3-E1在BaTiO3/Ti64復(fù)合材料上的成骨
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