LASS2-TMSG-1 基因誘導人肺癌細胞發(fā)生凋亡的機制研究.pdf

1、目的：研究過表達及沉默LASS2/TMSG-1基因?qū)θ朔伟┘毎蹈咿D(zhuǎn)移潛能亞系95D細胞和低轉(zhuǎn)移潛能亞系95C細胞是否發(fā)生細胞凋亡及其相關(guān)機制。
　　方法：運用慢病毒轉(zhuǎn)染法將靶向LASS2/TMSG-1基因過表達慢病毒載體（8649）和LASS2/TMSG-1基因沉默慢病毒載體(30011-1)分別轉(zhuǎn)入到95D和95C細胞；采用流式細胞術(shù)觀察腫瘤細胞的凋亡能力；應用 CCK-8實驗法檢測腫瘤細胞的體外增殖能力；利用Western

2、Blot檢測LASS2/TMSG-1、Bcl-2、Bax、Cytochroem C、Caspase-9、Caspase-3、p-P38MAPK在細胞中的表達水平。統(tǒng)計學分析采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件，P＜0.05認為差別有顯著性，有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：⑴在95D細胞中，LASS2/TMSG-1過表達組經(jīng)Western Blot檢測細胞內(nèi)LASS2/TMSG-1蛋白水平明顯升高；流式細胞術(shù)測定顯示LASS2/TMSG-1基因過

3、表達能夠促進細胞發(fā)生凋亡；CCK-8測定顯示LASS2/TMSG-1基因過表達可以抑制細胞增殖；Western Blot分析表明LASS2/TMSG-1基因過表達使Bcl-2的表達減少，誘導Cytochroem C從線粒體釋放，促進Caspase-9和Caspase-3的激活和神經(jīng)酰胺下游效應分子P38MAPK的活化；與正常組和陰性對照組相比有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。⑵在95C細胞中，LASS2/TMSG-1沉默組經(jīng)Western

4、Blot檢測細胞內(nèi) LASS2/TMSG-1基因蛋白水平明顯下降；流式細胞術(shù)檢測LASS2/TMSG-1基因沉默組細胞的凋亡率明顯下降；CCK-8測定顯示沉默LASS2/TMSG-1基因能促進細胞增殖；Western Blot分析表明沉默LASS2/TMSG-1基因?qū)е翨cl-2升高，抑制Cytochroem C從線粒體釋放，并阻止Caspase-9和Caspase-3的活化和神經(jīng)酰胺下游效應分子P38MAPK的活化，與正常組和陰性對照