過敏性紫癜患者血清中IL-18IL-33及IL-35的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:過敏性紫癜(Henoch—schonlein purpura，HSP)是以侵犯皮膚或其他器官的毛細(xì)血管及毛細(xì)血管后靜脈的一種過敏性血管炎。主要累及皮膚、胃腸道系統(tǒng)和腎臟，伴或不伴關(guān)節(jié)疼痛或關(guān)節(jié)炎。兒童為高發(fā)人群且易反復(fù)發(fā)作。目前，過敏性紫癜的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，多認(rèn)為與T細(xì)胞亞群紊亂，輔助性T淋巴細(xì)胞亞群(Th1/Th2)免疫應(yīng)答失衡，Th17、Treg細(xì)胞失衡有關(guān)[1]。
　　白介素18（IL-18）是一種復(fù)雜的前炎癥性

2、細(xì)胞因子，在炎癥反應(yīng)中起著雙向調(diào)節(jié)作用。既能促進(jìn)Th1型免疫反應(yīng)，在一定條件下，又能促進(jìn)Th2型免疫反應(yīng)，IL-18屬于IL-1家族，是在免疫應(yīng)答中有重要調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子，在許多細(xì)胞中均有表達(dá)，如淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。能激活T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，產(chǎn)生一系列細(xì)胞因子，從而促進(jìn)炎癥的發(fā)展。在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答中扮演著重要角色[2]。白介素33（IL-33）是2005年由Schmitz等研究發(fā)現(xiàn)的一種IL-1家族中的細(xì)胞因子，主要由活化的T

3、細(xì)胞分泌，參與免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)。IL-33與IL-18結(jié)構(gòu)最為相似，通過信號(hào)通路介導(dǎo)其生物學(xué)活性，并參與以Th2細(xì)胞為主的炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)Th2細(xì)胞的活化[3]。白介素35(IL-35)屬于Ⅰ型細(xì)胞因子超家族成員，白介素12(IL-12)家族的新成員，Collison等初步證實(shí)IL-35主要由Treg細(xì)胞分泌，對(duì)免疫反應(yīng)具有負(fù)向抑制作用，可抑制炎癥反應(yīng)、防止過度的自身免疫反應(yīng)的發(fā)生。目前已有的研究顯示，IL-35能有效增強(qiáng)Treg細(xì)胞亞

4、群的功能，并且有效抑制Th17細(xì)胞的增殖分化，抑制機(jī)體過度的免疫反應(yīng)，阻止炎癥對(duì)機(jī)體的免疫損傷的作用[4]。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)定量檢測過敏性紫癜病患者血清中IL-18和IL-33及IL-35的表達(dá)水平。初步探討IL-18、IL-33與IL-35在過敏性紫癜發(fā)病中的作用，從而進(jìn)一步了解過敏性紫癜發(fā)病過程中致炎因子與抗炎因子的作用。
　　方法:選擇2013年1月至2013年6月期間就診于河北醫(yī)科大學(xué)第

5、二醫(yī)院皮膚科門診的初發(fā)過敏性紫癜患者為病例組。病例組共30例，其中男14例，女16例，年齡8-27歲，平均年齡16.57±4.06歲。納入標(biāo)準(zhǔn):1符合過敏性紫癜皮膚型診斷標(biāo)準(zhǔn)（無腹痛，無關(guān)節(jié)痛，無腎臟損害），血小板計(jì)數(shù)正常;2無家族性出、凝血疾病史;3就診前至少4周內(nèi)未接受如糖皮質(zhì)激素類藥物、細(xì)胞毒性藥物等，對(duì)免疫系統(tǒng)有較大影響的藥物治療;4除外自身免疫性疾病，各種嚴(yán)重的慢性系統(tǒng)性疾病。正常對(duì)照組來自健康的體檢人員。共20例，其中男9例

6、，女11例，年齡12-28歲，平均年齡18.05±3.59歲。經(jīng)t檢驗(yàn)，性別、年齡與病例組無顯著差異。采集病例組與正常對(duì)照組肘靜脈血2ml，離心后，將收集到的血清標(biāo)本放入-70℃的冰箱中保存。應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA方法）檢測血清標(biāo)本中IL-18、IL-33及IL-35的表達(dá)水平，將所得數(shù)據(jù)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)所得數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，故統(tǒng)計(jì)方法選用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)法，對(duì)過敏性紫癜病例組和正常對(duì)

7、照組的血清IL-18、IL-33及IL-35的水平進(jìn)行有無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)取P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA方法檢測結(jié)果(pg/ml):
　　1.血清中IL-18表達(dá)量為:病例組142.41±92.06高于正常對(duì)照組78.89±21.58，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.63 P=0.001 P＜0.05);
　　2.血清中IL-33表達(dá)量為:病例組65.26±33.30高

8、于正常對(duì)照組37.91±30.97，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.92 P=0.005 P＜0.05);
　　3.血清中IL-35表達(dá)量為:病例組58.55±16.32低于正常對(duì)照組81.03±29.90，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-3.07 P=0.005 P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.過敏性紫癜患者血清中IL-18的表達(dá)水平顯著高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示IL-18可能參與過敏性紫癜早期炎癥反應(yīng)的發(fā)生。<

9、br>　　2.過敏性紫癜患者血清中IL-33的表達(dá)水平顯著高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示IL-33可能在過敏性紫癜的發(fā)病機(jī)制中有一定的作用，緣于其與IL-18結(jié)構(gòu)的相似性，可能與IL-18發(fā)揮著相似的致炎作用。同時(shí)也間接反映了Th1/Th2在過敏性紫癜發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著一定的作用。
　　3.過敏性紫癜患者血清中IL-35的表達(dá)水平低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示在發(fā)病初期IL-35的表達(dá)水平受到了一定程度的抑制，導(dǎo)致其