液-固界面的吸附及溶菌酶在液相色譜中復(fù)性的應(yīng)用研究.pdf

1、西北大學(xué)博士學(xué)位論文液固界面的吸附及溶菌酶在液相色譜中復(fù)性的應(yīng)用研究姓名：王彥申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：耿信篤20021001SDT—R)這兩個(gè)分別表征吸附和保留過(guò)程的理論統(tǒng)一了起來(lái)，證明在SDTR中的容量因子的對(duì)數(shù)logk’與SDT—A中溶質(zhì)對(duì)吸附劑親合勢(shì)的參數(shù)p。之間存在線(xiàn)性關(guān)系。從理論上推導(dǎo)出口。值與溶劑濃度的對(duì)數(shù)作圖收斂點(diǎn)的存在并闡明了收斂點(diǎn)坐標(biāo)的物理意義，與實(shí)驗(yàn)作圖法得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行了對(duì)比，符合情況很好。4從氣一

2、固吸附體系中推導(dǎo)出的Langmuir方程，在氣固吸附中是一個(gè)定量的公式，但近一世紀(jì)來(lái)只能經(jīng)驗(yàn)性地描述組份在液相中的吸附。本研究以液固界面上的SDT為基礎(chǔ)，考慮到液固吸附體系中各組分之間的相互作用，首次從理論上推導(dǎo)出了在液固體系中描述在不同溶劑濃度條件下，溶質(zhì)從溶液中吸附的Langmuir公式，并稱(chēng)其為擴(kuò)展的Langmuir公式。以不同溶劑濃度條件下所得到的吸附等溫線(xiàn)數(shù)據(jù)對(duì)理論推導(dǎo)出的擴(kuò)展的Langmuir公式進(jìn)行了驗(yàn)證，與計(jì)量置換平衡中

3、的參數(shù)相關(guān)聯(lián)，表明用吸附等溫線(xiàn)法計(jì)算的計(jì)量置換參數(shù)z與用高效液相色譜法得到的z值符合程度很好同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)卵清蛋白在疏水整體色譜柱的吸附與流動(dòng)相中鹽濃度有直接的關(guān)系。當(dāng)?shù)鞍自谏V柱上保留時(shí)，在相同的溶質(zhì)濃度條件下其吸附量的對(duì)數(shù)與置換劑水的摩爾濃度對(duì)數(shù)之間有非常好的線(xiàn)性關(guān)系。5以溶菌酶(Lys)為目標(biāo)蛋白，用紫外(UV)，熒光(FR)，RPLC，弱陽(yáng)離子交換色譜(WCX)及SDT中的Z值系統(tǒng)地研究了四種不同變性狀態(tài)(胍變還原與非還原，脲變還

4、原與非還原)的Lys的分子構(gòu)象變化，并與其天然態(tài)進(jìn)行了比較發(fā)現(xiàn)這四種不同變性狀態(tài)的Lys與天然態(tài)Lys的uV之間沒(méi)有明顯區(qū)別，但與天然態(tài)相比，這四種變性態(tài)的tys的FR卻都有紅移現(xiàn)象然而熒光光譜并不能反映出這四種變性態(tài)以不同的變性方式所引起的分子構(gòu)象變化Lys在RPLC和WCX的保留行為卻能夠反映出其還原變性態(tài)與非還原變性態(tài)之間的差別，但仍不能顯示出不同變性劑引起的蛋白分子的構(gòu)象變化只有液固界面上SDT中的參數(shù)Z值才能反映出上述所有的差