蛋白質(zhì)磷酸酶1（PP-1）對轉(zhuǎn)錄因子Pax-6的功能修飾.pdf

1、Pax-6是進化上一個保守而重要的轉(zhuǎn)錄因子，它在眼睛與大腦發(fā)育中起著主導基因的作用，決定著人類，小鼠，斑馬魚和果蠅的晶體細胞分化。 到目前為止，不同形式的Pax-6已被發(fā)現(xiàn)，它們有著不同的分子量。但這并不意味著它們中的全部都已經(jīng)被仔細的研究過，也并不意味著它們的蛋白質(zhì)翻譯后修飾作用被完整的詮釋。前人的研究已經(jīng)表明Pax-6是一個磷酸化蛋白，它受ERK，p38和HIPK2這三種激酶作用而發(fā)生磷酸化，并且它在磷酸化以后能大大的激活

2、其轉(zhuǎn)錄的活性。然而，其去磷酸化修飾作用卻不為人所知。 為了了解Pax-6的脫磷酸化修飾作用，作者首先研究了蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶使Pax-6脫磷酸化的可能性。研究結(jié)果表明，PP-1和PP-2A這兩種蛋白質(zhì)磷酸酶均能在體外使Pax-6脫磷酸化。第二，作者檢測了是否PP-1與PP-2A這兩種蛋白質(zhì)磷酸酶能特異地在體內(nèi)使Pax-6脫去磷酸基團。結(jié)果表明，只有PP-1能與Pax-6在體內(nèi)發(fā)生反應，使其脫磷酸化。第三，通過免疫共沉降

3、的辦法，作者發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)的大部分Pax-6與PP-1的α催化亞基，或者β催化亞基結(jié)合在一塊；然而只有少量的α催化亞基或者β催化亞基與Pax-6結(jié)合；PP-2A的A，B，C三種亞基與Pax-6沒有相互作用。第四，隨著Calyculin A這種PP-1抑制劑處理濃度的提高，與Pax-6結(jié)合的PP-1α催化亞基或者β催化亞基依次減少。當在人類晶體上皮細胞(HLE)中高表達PP-1α時，Pax-6的脫磷酸化增強；而此時用Calyculin A處理