青稞散黑穗病拮抗菌LN-176的分離鑒定、發(fā)酵條件及發(fā)酵產(chǎn)物的初步研究.pdf

1、從西藏佩古錯(cuò)湖湖邊的土壤中分離得到一株對(duì)青稞散黑穗病原菌具有較強(qiáng)抑制作用的細(xì)菌，根據(jù)菌株的形態(tài)學(xué)特征和生理生化試驗(yàn)，初步鑒定為多粘芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)，命名為L(zhǎng)N-176。菌體呈細(xì)桿狀，革蘭氏染色陽(yáng)性，染色均勻，具運(yùn)動(dòng)性，可形成內(nèi)生孢子，芽孢囊膨大，芽孢橢圓形，中生到次端生。該菌株在LB培養(yǎng)基上呈白色圓形不透明菌落，直徑約1～2mm，菌落邊緣不規(guī)則，表面干燥。能發(fā)酵葡萄糖、木糖、甘露醇產(chǎn)酸并產(chǎn)氣，不能發(fā)酵阿拉伯

2、糖。能還原硝酸鹽，形成二羥基丙酮，但不能利用檸檬酸鹽和丙酸鹽，對(duì)NaCl的耐受量低于5％。根據(jù)以上特征，查閱《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》(第九版)可初步將其鑒定為芽孢桿菌屬的多粘芽孢桿菌(B.polymyxa)，命名為B.polymyxa LN-176。 進(jìn)一步通過(guò)PCR擴(kuò)增克隆得到LN-176的16S rDNA并測(cè)序。將該序列在GenBank中進(jìn)行同源性比對(duì)，所獲得的同源序列均為芽孢桿菌屬和類芽孢桿菌屬的16S rDNA序列，

3、其同源性都在90％以上。與該序列同源性最高的是芽孢桿菌屬B.polymyxa，其同源性達(dá)100％，與類芽孢桿菌屬R.kribbensis、P.azotofixans、P．burgondia、P．peoriae的同源性均為99％。在此基礎(chǔ)上將BLAST得到的16S rDNA序列用DNAman軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。分子鑒定的結(jié)果進(jìn)一步表明LN-176菌株為芽孢桿菌屬的多粘芽孢桿菌。 該菌株對(duì)多種植物病原菌、部分革蘭氏陽(yáng)性菌及革蘭氏陰性