TAB1與p38α特異性相互作用的決定因素.pdf

1、細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導途徑調(diào)節(jié)細胞對于來自胞內(nèi)外刺激的反應。絲裂原活化蛋白激酶信號轉(zhuǎn)導途徑是真核生物中普遍存在的信號轉(zhuǎn)導機制之一，三級激酶級聯(lián)反應是其通路的核心成份。然而2002年Ge等發(fā)現(xiàn)TAB1所介導的p38α自我磷酸化反應打破了傳統(tǒng)的MAPK家族只能通過三級激酶的磷酸化途徑來激活的觀念，這一直接激活機制，成為MAPK激活機制的一個有力補充。此外，TAB1與p38α的相互作用在p38家族中是十分特異的。因而確定TAB1和p38α相互作用必

2、需區(qū)域氨基酸的序列將有助于對這一令人感興趣的蛋白-蛋白相互作用的分子機制的理解。 本論文分析了TAB1的缺失突變體和點突變體與p38α的相互作用，發(fā)現(xiàn)其羧基末端的脯氨酸殘基(Pro412)是與p38α結(jié)合的必要位點，并進一步發(fā)現(xiàn)Pro412氨基末端存在一個貌似“D-結(jié)構(gòu)域”的結(jié)合位點，而Pro412正好處于結(jié)合位點的ФB+3的位置。通過突變體分析，我們發(fā)現(xiàn)以前報道的p38α中的疏水結(jié)合槽也與該相互作用有關(guān)，而CD結(jié)構(gòu)域和ED位點

3、卻與之無關(guān)。同時，用不與TAB1相互作用的p38β和p38α構(gòu)建嵌合拼接體，發(fā)現(xiàn)Thr218和Ile275是p38α特異性結(jié)合于TAB1的重要位點。并且將其中的任何一個殘基置換為p38β的相應氨基酸都會阻止p38α和TAB1結(jié)合。當p38α的底物和激活物與p38α結(jié)合時，結(jié)合位點(p38α的疏水結(jié)合槽)發(fā)生了較大的構(gòu)象改變，而Thr218和Ile275恰在這個位置附近，這提示我們TAB1誘導p38α自我磷酸化也可能是由于p38α發(fā)生了類