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1、轉(zhuǎn)座元件是基因組中一類(lèi)可移動(dòng)的DNA片段。這些轉(zhuǎn)座元件可從基因組的一個(gè)位置直接移動(dòng)到另一個(gè)位置,從而導(dǎo)致基因組的內(nèi)部產(chǎn)生突變。真核基因組內(nèi)存在著各種不同類(lèi)型的轉(zhuǎn)座元件,其數(shù)量極其地龐大。幾十年來(lái),隨著對(duì)轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)和其轉(zhuǎn)座機(jī)制不斷的探索,所積累的認(rèn)知水平已相當(dāng)豐富,并對(duì)現(xiàn)代遺傳性的發(fā)展產(chǎn)生了深遠(yuǎn)的影響。然而,許多有關(guān)轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座的分子細(xì)節(jié)卻還有待于進(jìn)一步明了,例如MITEs的起源就所知甚少,主要存在兩種假說(shuō)。
本文所關(guān)注的科學(xué)問(wèn)題
2、是:“MITEs究竟是如何起源的?”。我們的觀(guān)點(diǎn)是:也許二種假說(shuō)相互間并不矛盾,因?yàn)槠浜诵膬?nèi)容都一致地假定MITEs家族的起源是由一個(gè)或者少數(shù)幾個(gè)祖先擴(kuò)增而來(lái)。要回答以上問(wèn)題,就必須詳細(xì)地觀(guān)察MITE元件,在進(jìn)化的壓力下是以何種方式進(jìn)行擴(kuò)增的?其轉(zhuǎn)座的分子細(xì)節(jié)又當(dāng)如何?
本文的研究就此問(wèn)題展開(kāi)。首先我們建立了適用于MITEs轉(zhuǎn)座活性檢測(cè)的生物學(xué)表型,然后TD實(shí)驗(yàn)提示出mPing元件和SZ-2元件都具潛在的轉(zhuǎn)座活性,后續(xù)的又對(duì)兩
3、個(gè)元件的TD片段進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以及雙帶型PCR確認(rèn)實(shí)驗(yàn)都再次確認(rèn)了mPing元件和SZ-2元件確實(shí)都正在發(fā)生著轉(zhuǎn)座事件。本文構(gòu)建完成了一組能夠應(yīng)用于檢測(cè)MITE元件轉(zhuǎn)座活性的生物學(xué)表型,為進(jìn)一步解析MITE的轉(zhuǎn)座機(jī)制,提供一個(gè)明確而實(shí)用的實(shí)驗(yàn)體系。而且所獲的hopi轉(zhuǎn)座結(jié)果是由同一個(gè)水稻品系在同一個(gè)遺傳背景下的平行對(duì)比實(shí)驗(yàn)過(guò)程中得到確認(rèn)的,因而是一個(gè)有關(guān)hopi轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座最直接的證據(jù)。最后本文觀(guān)察到在同一個(gè)等位基因位點(diǎn)上可以同時(shí)出現(xiàn)完整
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