原子力顯微鏡在人工磷脂雙分子層、膜蛋白和成纖維細(xì)胞的應(yīng)用研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)通過原子力顯微鏡研究人工磷脂雙分子層模型,膜蛋白和活細(xì)胞,擬深入了解它在生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用,并表明它在未來生物學(xué)領(lǐng)域的研究中將起到的重要作用.第一部分 目的:通過原子力顯微鏡成像,從納米水平了解人工磷脂雙分子層模型的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié).方法:運(yùn)用原子力顯微鏡觀察囊泡融合法形成的單組份和多組份人工磷脂雙分子層模型.結(jié)果:原子力顯微鏡可以在納米水平觀察人工磷脂雙分子層模型和其流動性:同時進(jìn)行磷脂雙分子層高度測量.結(jié)論:原子力顯微鏡是進(jìn)行人工磷脂雙

2、分子層模型研究的良好方法.為細(xì)胞膜的進(jìn)一步研究打下基礎(chǔ).第二部分 目的:以丙型肝炎病毒p7蛋白為模型,探討原子力顯微鏡在膜蛋白方面的研究.方法:在云母表面準(zhǔn)備p7蛋白樣品以及將p7合并到磷脂雙分子層中,進(jìn)行扣擊模式原子力顯微鏡的觀察.結(jié)果:可清晰觀察p7蛋白分子離子隧道結(jié)構(gòu).p7合并到磷脂雙分子層中后,始終存在于DOPC液相中,并出現(xiàn)多個蛋白逐漸結(jié)合的現(xiàn)象.結(jié)論:原子力顯微鏡能夠用于膜蛋白的基本結(jié)構(gòu)特征的觀察,同時可了解磷脂雙分子層對膜

3、蛋白所產(chǎn)生的影響,為后期細(xì)胞表面膜蛋白的原子力顯微鏡研究打下基礎(chǔ).第三部分 目的:通過原子力顯微鏡研究成纖維細(xì)胞.觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞接觸、細(xì)胞的重疊和藥物對細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的作用.方法:對培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞進(jìn)行原子力顯微鏡成像;成纖維細(xì)胞在藥物作用下的共聚焦顯微鏡研究;在藥物作用下,進(jìn)行時間間隔的原子力顯微鏡的活細(xì)胞觀察.結(jié)果:原子力顯微鏡可以清晰觀察成纖維細(xì)胞,部分細(xì)胞呈復(fù)層生長,其細(xì)胞突結(jié)構(gòu),如板狀偽足清晰可辨.采用Alexa Fluor