鹽脅迫誘導(dǎo)擬南芥氣孔關(guān)閉過程中ABA與H-,2-O-,2-信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究.pdf

1、河南大學(xué)碩士學(xué)位論文鹽脅迫誘導(dǎo)擬南芥氣孔關(guān)閉過程中ABA與HO信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究姓名：楊葉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：宋純鵬董發(fā)才2002.5.1籃胨追跨辱擬審芥乞芤哭閉遼疆中^隊(duì)茸H：02信號(hào)籜辱研覽摘要植物激素脫落酸(ABA)調(diào)節(jié)植物多種生理過程，尤其在逆境條件下，植物體內(nèi)ABA大量合成，誘導(dǎo)氣孔關(guān)閉。從而有效調(diào)控植物體內(nèi)的水分平衡。盡管人們對(duì)ABA誘導(dǎo)氣孔關(guān)閉的作用已取得共識(shí)，但對(duì)其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的某些細(xì)節(jié)問題仍不清楚。新篩選的擬

2、南芥ABA缺失突變體los5為研究ABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)提供了便利的條件。本文以Ios5及其相應(yīng)野生型為材料，采用表皮條生物分析、激光掃描共聚焦顯微技術(shù)及膜片鉗技術(shù)研究了NaCl脅追條件下，ABA誘導(dǎo)保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)H202的產(chǎn)生及二者在誘導(dǎo)氣孔關(guān)閉中的作用。主要結(jié)果如下：正常生長條件下。los5與野生型葉片表面氣孔的密度、形狀及氣孔開度均無明顯區(qū)別。100mMNacl可有效誘導(dǎo)野生型開放的氣孔關(guān)閉，而對(duì)10s5氣孔開度的影響不很明顯；100mMNa

3、Cl與lO“M的ABA共處理時(shí)，野生型及10s5氣孔開度均明顯減小，且幅度類似。該結(jié)果再次驗(yàn)證了ABA在誘導(dǎo)氣孔關(guān)閉中的重要作用。H202可促進(jìn)野生型與Ios5的氣孔關(guān)閉，而且10’1104M的H202的誘導(dǎo)的氣孔關(guān)閉具有可逆性，F(xiàn)DA檢測(cè)表明該濃度范圍的H202處理時(shí)保衛(wèi)細(xì)胞保持良好的活性；104M的H202的誘導(dǎo)的氣孔關(guān)閉不可逆，并伴隨著保衛(wèi)細(xì)胞活性的喪失。H202的清除劑cAT(20u，m1)和Vc(10mM)可以部分逆轉(zhuǎn)Nacl

4、誘導(dǎo)的野生型氣孔關(guān)閉，也可部分逆轉(zhuǎn)NaclABA誘導(dǎo)的野生型及l(fā)os5的氣孔關(guān)閉，但CAT和vc對(duì)Nacl處理時(shí)los5的氣孔開度無明顯影響，而且cAT和Vc分別單獨(dú)處理時(shí)促進(jìn)氣孔開放的作用也非常微弱。這些結(jié)果說明Nacl脅迫條件下，ABA誘導(dǎo)了氣孔關(guān)閉，而且，H202可能是ABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)鏈的一個(gè)中間成分。以H202熒光探針H歸CFDA結(jié)合激光掃描共聚焦顯微技術(shù)直接檢測(cè)了保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)的H20】產(chǎn)生情況。未加任何處理之前，野生型與los5保

5、衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度幾乎相等。外源100mMNacl處理時(shí)野生型保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)熒光顯著增強(qiáng)，而los5保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)熒光只有輕微的增強(qiáng)處理15分鐘時(shí)，野生型保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度為los5的217倍：lOOmMNacI與10州ABA共處理可誘導(dǎo)野生型及Ios5胞內(nèi)熒光均迅速增強(qiáng)，5分鐘時(shí)熒光已布滿整個(gè)細(xì)胞。胞外vc(10mM)可完全阻斷NaCl及NaCIABA誘導(dǎo)的熒光增強(qiáng)，而胞外cAT(20u，m1)只能抑制Nacl及NaclABA處理時(shí)保衛(wèi)細(xì)胞質(zhì)膜