CTLA-4、PDCD1基因與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的遺傳易感性及表型相關(guān)性研究.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus,SLE)是一多因子遺傳相關(guān)疾病,遺傳因素在SLE的發(fā)病中起著重要作用。本次研究采用病例對(duì)照研究、病例親本研究和單純病例研究設(shè)計(jì),應(yīng)用DNA體外擴(kuò)增—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RestrictionFragmentLengthPolymorphism,RFLP)等分子生物學(xué)技術(shù),在華東地區(qū)漢族人群中探

2、討了遺傳因素與SLE發(fā)病及其表型的相關(guān)性。結(jié)果如下:
　　 一、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的遺傳易感性研究
　　 (一)、基因多態(tài)位點(diǎn)基因型及等位基因分布
　　 1.CTLA-4基因-1722T＞C位點(diǎn)在病例組和對(duì)照組中T、T、C/T和C/C基因型頻率有顯著性差異(X2=7.828,P=0.020),以C/C基因型為參照,具有T/T基因型者,其SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)升高,OR為1.98(95％CI:1.21-3.23),具有C/T或

3、T/T基因型者,其OR為1.65(95％CI:1.06-2.57);病例組和對(duì)照組-1722T等位基因和-1722C等位基因頻率有顯著性差異,(X2=8.070,P=0.005),病例組-1722T等位基因頻率高于對(duì)照組(63.6％vs55.3％)。
　　 2.CTLA-4基因-318C＞T位點(diǎn)在病例組和對(duì)照組中基因型及等位基因頻率分布未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 3.PD12位點(diǎn)在病例組和對(duì)照組中A/A、A/G和G/G基因

4、型頻率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=37.313,df=2,P＜0.001)；以A/A基因型為參照,具有A/G基因型者,其SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)升高(OR=2.70,95％CI:1.90-3.84),G/G基因型者SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)也升高(OR=3.84,95％CI:1.94-7.59),A/G或G/G基因型攜帶者,其OR為2.84(95％CI:2.02-3.98);病例組和對(duì)照組A等位基因和G等位基因頻率有顯著性差異,(X2=34.452,P＜0.0

5、01),病例組G等位基因頻率高于對(duì)照組(36.4％vs20.7％)。
　　 4.PD15位點(diǎn)在病例組和對(duì)照組中C/C、C/T和T/T基因型頻率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=7.699,df=2,P=0.021);以C/C基因型為參照,具有C/T基因型者,其SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)升高(OR=1.60,95％CI:1.14-2.45),C/T或T/T基因型攜帶者,其OR為1.52(95％CI:1.08-2.12);病例組和對(duì)照組C等位基因和T等

6、位基因頻率有顯著性差異,(X2=4.473,P=0.034),病例組T等位基因頻率高于對(duì)照組(24.4％vs19.20％)。
　　 5.PD16位點(diǎn)在病例組和對(duì)照組A/A、A/G和G/G基因型頻率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=20.842,df=2,P＜0.001);以A/A基因型為參照,A/G基因型攜帶者的SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)升高(OR=1.83,95％CI:1.29-2.59),G/G基因型攜帶者的SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)同樣升高(OR=5.93

7、,95％CI:2.17-16.17),A/G或G/G基因型攜帶者,其OR為2.04(95％CI:1.45-2.85);病例組和對(duì)照組A等位基因和G等位基因頻率有顯著性差異(X2=20.769,P＜0.001,),病例組G等位基因頻率高于對(duì)照組(28.6％vs17.0％)。
　　 (二)、連鎖不平衡檢驗(yàn)及單倍型分析
　　 1.連鎖不平衡檢驗(yàn)顯示,CTLA-4基因兩位點(diǎn)不同等位基因之間不是隨機(jī)組合的,呈不完全連鎖不平衡狀態(tài);

8、PDCD1基因兩兩位點(diǎn)不同等位基因之間也不是隨機(jī)組合的,呈不完全連鎖不平衡狀態(tài)。
　　 2.單倍型在病例組和對(duì)照組分布分析結(jié)果顯示,CTLA-4基因具有T-C、T-T單倍型者SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加,具有C-C單倍型者SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低。PDCD1基因具有A-C-G、A-T-A、G-C-A單倍型者SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加,具有A-C-A單倍型者SLE發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低。
　　 (三)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡傳遞不平衡檢驗(yàn)
　　 1.CTL

9、A-4-1722T＞C位點(diǎn)在家系中傳遞,經(jīng)TDT與sTDT的聯(lián)合檢驗(yàn)Zcomb=2.121,P＜0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.PD15T等位基因傳遞給患病子代的概率大于C等位基因,TDT檢驗(yàn),X2=4.840,聯(lián)合檢驗(yàn)Zcomb=2.020,P均＜0.05。
　　 3.PD12位點(diǎn)和PD16位點(diǎn)未發(fā)現(xiàn)家系中傳遞/不平衡統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性,Zcomb分別為0.560、0.695,P＞0.05。
　　 二、

10、系統(tǒng)性紅斑狼瘡基因與表型的相關(guān)性研究
　　 1.CTLA-4基因多態(tài)性與臨床表型關(guān)系的分析顯示,-1722T＞C位點(diǎn)與抗SSA抗體相關(guān),以C/C基因型為參照,抗SSA抗體陽性的患者中T/C基因型的頻率升高(P=0.030,OR=2.91,95％CI:1.11-7.65),T/T基因型的頻率也升高(P=0.023,OR=3.12,95％CI:1.16-8.36)。-318C＞T位點(diǎn)與抗RNP抗體相關(guān),抗RNP抗體陽性的患者中-31

11、8C＞T位點(diǎn)C/T與T/T合并基因型的頻率降低(P=0.044,OR=0.41,95％CI:0.17-0.95)。PDCD1基因多態(tài)性與臨床表型關(guān)系的分析顯示,PD16位點(diǎn)多態(tài)性與抗SSA抗體相關(guān),以A/A基因型為參照,抗SSA抗體陽性的SLE患者中PD16位點(diǎn)G/G基因型頻率更低(P=0.016,OR=0.23,95％CI:0.07-0.76);PD12位點(diǎn)與漿膜及腎臟損害相關(guān),以A/A基因型為參照,漿膜和腎臟損害的SLE患者中PD1

12、2位點(diǎn)G/G基因型的頻率較高(P=0.002,OR=7.31,95％CI:2.08-25.74;P=0.011,OR=3.91,95％CI:1.36-11.21)。
　　 2.在單倍型與臨床表型的相關(guān)性分析中,發(fā)現(xiàn)以不具備某種單倍型為參照,CTLA-4基因的C-C對(duì)ANA、抗SSA及補(bǔ)體C3C4具有保護(hù)作用,對(duì)抗dsDNA、抗Sm、抗RNP、皮膚黏膜、關(guān)節(jié)、漿膜、腎臟和血液系統(tǒng)損害表現(xiàn)為危險(xiǎn)作用;T-C對(duì)ANA、抗Sm、關(guān)節(jié)、漿

13、膜和腎臟損害表現(xiàn)為保護(hù)作用,對(duì)抗dsDNA、抗SSA、抗SSB及補(bǔ)體C3C4、皮膚和血液系統(tǒng)表現(xiàn)為危險(xiǎn)作用;T-T對(duì)ANA、抗Sm、腎臟、神經(jīng)和血液系統(tǒng)損害表現(xiàn)為危險(xiǎn)作用,而對(duì)抗dsDNA、抗SSA、抗RNP、補(bǔ)體C3C4、皮膚和關(guān)節(jié)表現(xiàn)為保護(hù)作用。PDCD1基因的A-C-A為抗dsDNA、抗SSA、血液系統(tǒng)損害的危險(xiǎn)單倍型,為抗Sm、抗SSB、抗RNP、C3C4、關(guān)節(jié)、腎臟和神經(jīng)的保護(hù)單倍型:A-T-A為ANA的保護(hù)單倍型,為抗Sm、

14、抗SSB和關(guān)節(jié)損害的危險(xiǎn)單倍型;G-C-A為抗dsDNA、抗SSA和關(guān)節(jié)損害的保護(hù)單倍型,為抗Sm、抗SSB、C3C4、皮膚黏膜、漿膜、腎臟、神經(jīng)和血液系統(tǒng)損害的危險(xiǎn)單倍型;G-C-G為ANA、抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗SSB、皮膚黏膜和關(guān)節(jié)損害的危險(xiǎn)單倍型,為抗RNP、C3C4、神經(jīng)和血液系統(tǒng)的保護(hù)單倍型;G-T-A為ANA、抗dsDNA、抗Sm、抗SSA和關(guān)節(jié)損害的保護(hù)單倍型,為抗SSB、抗RNP、C3C4、皮膚黏膜、漿膜和