貫葉金絲桃指杭州圖譜研究.pdf

1、本研究以貫葉金絲桃的干燥地上部分為原料，采用超聲波輔助法和回流法對甲醇、乙醇和丙酮溶劑體系的提取條件進行系統(tǒng)研究，考察了高效液相色譜法(HPLC)的方法學，對貫葉金絲桃中蘆丁、金絲桃苷和槲皮素進行含量測定，建立了貫葉金絲桃HPLC指紋圖譜。
　　 1．共收集貫葉金絲桃藥材14批、提取物和制劑各2批，并對貫葉金絲桃藥材進行生藥學鑒定。
　　 2．貫葉金絲桃藥材成分的提取條件研究
　　 (1)提取方法篩選，以甲醇和乙

2、醇為溶劑，采用超聲波輔助提取法、回流法、索氏提取法及滲漉法提取，通過HPLC分析，根據檢測到峰的個數及峰高，選取超聲波輔助和回流提取。
　　 (2)提取條件選擇，采用超聲波輔助法和回流法對甲醇、乙醇和丙酮溶劑體系的提取條件進行單因素（溶劑濃度、料液比、提取時間、提取次數及超聲功率）實驗，在λ,=589nm下比色和HPLC進行檢測，確定了貫葉金絲桃中有效成分的提取工藝，即：以100％丙酮超聲提取，料液比1:40，超聲3次，每次40

3、min，超聲功率為200W。
　　 3．高效液相色譜條件的考察
　　 高效液相色譜方法學研究，考察五種流動相，并對流動相的梯度洗脫程序進行研究，且考察了檢測波長、流速，最終確定的色譜條件：色譜柱Diamonsil(?)C18(250mm×4.6mm，5μm);流動相：乙腈（10％甲醇、0.2％甲酸）-水（20％甲醇、0.2％甲酸）梯度洗脫，0～5min時乙腈10％，5～15min時乙腈10％→40％，15～40min時乙

4、腈40％→90％，40～50min時乙腈90％→100％，50～65min時乙腈100％，65～66min時乙腈100％→10％;檢測波長為270nm;流速為1.0ml/min;柱溫為室溫；進樣體積：20μL。
　　 4．樣品中蘆丁、金絲桃苷和槲皮素含量的同時測定
　　 以貫葉金絲桃藥材、提取物、制劑及原藥的花、葉、莖為對象，用HPLC進行含量測定。進行了方法學考察，精密度、重現性和穩(wěn)定性的RSD均在3％以內，符合要求。

5、標準曲線的線性（蘆丁22.7～227.0μg/mL，金絲桃苷24.0～240.0μg/mL，槲皮素39.7～397.0μg/mL）關系良好。藥材中，14號陜西鳳縣藥材中蘆丁和金絲桃苷含量最高，均為：0.251％，甘肅隴西藥材中槲皮素含量最高為0.097％。中間提取物中，楊陵沃森的蘆丁、金絲桃苷和槲皮素含量較高，分別為：0.511％、0.342％、0.974％。制劑中，Perika的蘆丁、金絲桃苷含量較高，分別為：1.138％和0.759

6、％，Nature Made中槲皮素含量較高為1.219％。葉中的蘆丁含量最高，為0.085％，花中的金絲桃苷和槲皮素含量最高，為0.118％和0.163％。
　　 5．貫葉金絲桃HPLC指紋圖譜的建立
　　 貫葉金絲桃藥材HPLC指紋圖譜共確立13個共有峰，其中14批藥材中10批藥材的相似度大于0.90。貫葉金絲桃提取物HPLC指紋圖譜共確立15個共有峰，2批提取物的相似度大于0.97。貫葉金絲桃制劑HPLC指紋圖譜共確