presepsin對燒傷膿毒癥早期診斷、判斷預后及指導抗生素使用的實驗研究.pdf

1、目的：膿毒癥是大面積燒（燙）傷、嚴重創(chuàng)傷、休克及各種重度感染等臨床急危重癥患者的嚴重并發(fā)癥，是全身炎癥反應綜合征的基礎上合并感染或高度可疑感染灶。膿毒癥是大面積燒傷患者主要死因之一，燒傷膿毒癥患者病情進展迅速，病死率極高，治療費用驚人。因此早期預測膿毒癥的發(fā)生發(fā)展，早期診斷并干預，是降低膿毒癥發(fā)病率及病死率的關鍵。膿毒癥的發(fā)生與發(fā)展伴隨著大量病理生理的變化，其中就包括各種炎癥生物標記物的變化。目前臨床上有很多關于膿毒癥早期監(jiān)測以及預后的

2、指標的研究，如廣泛應用的血清學預警指標血清降鈣素原(PCT)、C-反應蛋白(CRP)、活化蛋白等，但大面積燒傷本身也會引起這些指標的升高，使其在診斷預測評估燒傷患者合并膿毒癥的特異性及敏感性大大降低。近年來有研究顯示presepsin(sCD14-ST)是唯一與體內(nèi)感染相關的小分子可溶性蛋白，其水平不受各種創(chuàng)傷（包括燒傷）引起的SIRS的影響，這一特性可使其有望成為用來早期診斷、預測燒傷膿毒癥患者預后的新指標。鑒于此，本文的研究目的分為

3、以下三部分:
　　1.血漿presepsin水平對大鼠燒傷膿毒癥的早期診斷及鑒別診斷價值;
　　2.presepsin水平判斷大鼠燒傷膿毒癥嚴重程度及預測膿毒癥預后的意義;
　　3.presepsin指導抗生素在燒傷膿毒癥使用的實驗研究。
　　研究方法：第一章血漿presepsin水平對大鼠燒傷膿毒癥的早期診斷及鑒別診斷價值
　　實驗1.膿毒癥大鼠血漿presepsin及PCT的動態(tài)水平變化。
　　W

4、istar大鼠分成10組，每組6只共60只，按照4 ml/kg(濃度為1～5×1010cfu/ml)于腹腔內(nèi)注入對數(shù)生長期金葡菌標準株(ATCC25923)復制膿毒癥模型，并于第0h（注射金葡菌前）及注射金葡菌后第1，2，3，4，5，6，7，8，12h每一時間點取1組采取血標本ELlSA法檢測血漿presepsin及PCT水平。比較復制膿毒癥前后presepsin及PCT開始升高的時間及到達峰值時間。
　　實驗2.血漿presep

5、sin水平對大鼠燒傷膿毒癥的早期診斷及鑒別診斷價值。
　　Wistar大鼠分成4組:假燙傷組、10％TBSA燙傷組、30％TBSA燙傷組、30％TBSA燙傷+金葡菌組，每組42只共168只。10％TBSA燙傷組、30％TBSA燙傷組及30％TBSA燙傷+金葡菌組于24小時前按照不同面積予Ⅲ度燙傷，假燙傷組予用溫水(37℃)假燙傷按上述組別處理，30％TBSA燙傷+金葡菌組于第0h同法注射金葡菌標準株，各組均于第0h（注射金葡菌前）

6、，2h，12h，1d，3d，5d，7d每一時間點隨機取6只采取血標本ELISA法檢測血漿presepsin及PCT水平。對資料進行正態(tài)性檢驗，非正態(tài)資料兩兩比較采用Mann-Whitney U檢驗;多組間比較用Kruskal--Wallis H檢驗;用SPASS軟件行ROC曲線分析，觀察presepsin并比較PCT診斷大鼠燒傷膿毒癥的敏感性，特異性，陽性預測值，陰性預測值及約登指數(shù);以靈敏度為縱坐標，1-特異度為橫坐標，繪制ROC曲線

7、，確定檢測的最佳閾值。
　　第二章 presepsin水平判斷大鼠燒傷膿毒癥嚴重程度及預測膿毒癥預后的意義
　　72只Wistar大鼠分成生存組和死亡組，每組36只，24小時前均行30％TBSAⅢ度燙傷后生存組于第0h腹腔按照4 ml/kg(濃度為1～5×1010cfu/ml)注射對數(shù)生長期金葡菌標準株復制膿毒癥，死亡組按照4ml/kg(濃度為1～5×1012cfu/ml)注射同一對數(shù)生長期金葡菌標準株復制燒傷膿毒癥死亡模型

8、，兩組均于第0h（注射金葡菌前）及復制膿毒癥后第2h，4h，6h，8h，12h每一時間點隨機取6只采取血標本ELISA法檢測血漿presepsin及PCT水平。動態(tài)觀察比較同一時間點生存組和死亡組presepsin及PCT水平變化，評估對預測不同預后的意義。對資料進行正態(tài)性檢驗，非正態(tài)資料兩兩比較采用Mann-Whitney U檢驗;用SPASS軟件行ROC曲線分析，觀察presepsin并比較PCT預測大鼠燒傷膿毒癥預后的敏感性，特異

9、性，陽性預測值，陰性預測值及約登指數(shù);以靈敏度為縱坐標，1-特異度為橫坐標，繪制ROC曲線，確定判斷預后的最佳閾值。
　　第三章 presepsin指導抗生素在燒傷膿毒癥使用的實驗研究
　　Wistar大鼠分成治療組和對照組，每組48只共96只，各組于24小時前30％TBSAⅢ度燙傷后腹腔按照4 ml/kg(濃度為1～5×1010 cfu/ml)注射對數(shù)生長期金葡菌標準株復制膿毒癥，治療組在注射金葡菌6h后的第0h，24h，

10、48h按照1ml/kg股靜脈注射已配制好的頭孢曲松鈉溶液，對照組注射相同體積的生理鹽水，兩組均每日一次，連續(xù)三天。兩組于第0h（注射頭孢曲松或生理鹽水前）及注射頭孢曲松或生理鹽水后2h，6h，12h，18h，24h，48h，72h每一時間點隨機取6只采取外周血標本ELISA法檢測血漿presepsin及PCT水平。動態(tài)觀察比較同一時間點治療組和對照組presepsin及PCT水平變化，兩組間比較采用Mann-Whitney U檢驗，評估

11、對預后的意義。
　　研究結果：第一章
　　1.大鼠腹腔注射金葡菌復制膿毒癥模型后2小時血液presepsin開始升高，8小時后達高峰，開始升高時間及達峰值時間均早于降鈣素原，達高峰后逐漸下降。
　　2.大面積燒傷(30％TBSA)會引起血液presepsin水平的輕度升高，小面積(10％ TBSA)燒傷與對照組無差異;presepsin早期診斷燒傷膿毒癥的敏感性及特異性高于降鈣素原，其診斷膿毒癥較少受到燒傷本身干擾的影

12、響。
　　第二章
　　1.注入金葡菌后，生存組presepsin在升至一定水平后逐漸下降;死亡組注入金葡菌后presepsin水平逐漸升高并保持在一較高水平;
　　2.2h后各時間點死亡組presepsin水平均高于生存組，其差異具有統(tǒng)計學意義，對病情預測具有一定的價值;
　　3.presepsin預測燒傷膿毒癥預后的準確性及敏感度比PCT更高，特異度略低。
　　第三章
　　1.治療組與對照組血漿pr

13、esepsin水平都經(jīng)歷—先升高后下降的過程。治療組經(jīng)治療后經(jīng)歷—較低的高峰后逐漸在24h內(nèi)恢復正常;對照組經(jīng)歷—較高的高峰后在3d內(nèi)呈緩慢降低的趨勢，在最后檢測時間點(3d)尚未恢復至正常水平。
　　2.治療組與對照組比較，除0h時間點p值大于0.05無統(tǒng)計學意義外，余時間點p值均小于0.05，具有統(tǒng)計學意義。金黃色葡萄球菌誘導的presepsin水平的升高可經(jīng)治療后短期內(nèi)消除，治療效果明顯，因此presepsin可作為評價抗炎