真菌蛋白激發(fā)子PeaT1規(guī)?；l(fā)酵工藝及產品質量檢測技術研究.pdf

1、PeaT1蛋白是從極細鏈格孢菌(Alternaria tenuissima)中提取的一種蛋白激發(fā)子，能誘導多種作物產生系統(tǒng)獲得抗性。試驗表明PeaT1蛋白制劑對水稻、小麥、白菜、芹菜等都具有明顯的促生長、增產、提高果實品質和抗病抗逆的效果。為規(guī)?；a穩(wěn)定的PeaT1蛋白制劑，對其工廠化生產發(fā)酵技術進行了深入研究。根據極細鏈格孢菌的營養(yǎng)需求，通過正交設計試驗對該菌的培養(yǎng)基進行了改進和優(yōu)化，并進行了500L、5T和20T發(fā)酵罐的逐級發(fā)酵，

2、獲得了理想的蛋白制劑產品。使用高效液相色譜法、電泳法和比色法對制劑中的蛋白進行了定性和定量檢測，并進行了蛋白制劑和復配配方的室內生測，具體研究結果如下:
　　1.優(yōu)化了PeaT1蛋白工廠化生產的培養(yǎng)基配方。本文通過對蛋白激發(fā)子PeaT1的工廠化生產工藝研究，將極細鏈格孢菌的實驗室級發(fā)酵培養(yǎng)進行了進一步優(yōu)化，通過正交試驗確定了配方:木薯粉3.5％、黃豆粉1％、蔗糖0.5％、蛋白胨0.5％、味精0.5％、硫酸銨0.2％、硫酸亞鐵0.0

3、2％、硫酸鎂0.02％。
　　2.實現了500L、5000L和20000L發(fā)酵罐發(fā)酵參數的逐級放大。對500L、5T和20T發(fā)酵罐發(fā)酵參數進行試驗，掌握了其發(fā)酵時間分別為40h、26h和20h。對發(fā)酵過程中的動態(tài)參數進行監(jiān)控，得到了pH值、溶氧量、溫度等指標的動態(tài)曲線。
　　3.建立了蛋白產品中PeaT1的檢測技術。通過HPLC、SDS-PAGE的方法對制劑進行蛋白成分分析，鑒定出產品中PeaT1蛋白成分，為產品有效成分檢測

4、提供了鑒定方法。建立基于BrMford法對產品有效成分含量的快速檢測技術，為產品含量提供了檢測方法，為規(guī)?；l(fā)酵生產提供了質量控制手段。
　　4.通過室內生測對工業(yè)設備制得的PeaT1蛋白制劑穩(wěn)定性進行檢測。通過將PeaT1制劑對小麥、玉米種子進行浸種處理，發(fā)現各批次較清水對照均有明顯提高，各批次間差異不顯著，證明工業(yè)化生產的制劑穩(wěn)定可靠。
　　5.確定了蛋白激發(fā)子PeaT1與井岡霉素復配的最佳配比。將蛋白激發(fā)子PeaT1制