壬基酚對(duì)體外培養(yǎng)Leydig細(xì)胞睪酮合成影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:探討壬基酚對(duì)體外培養(yǎng)Leydig細(xì)胞睪酮合成及其關(guān)鍵酶3β-HSD、P450scc的影響。
　　 方法:建立體外培養(yǎng)大鼠Leydig細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法,染壬基酚(0、0.1、1、10μmol/L)24h后,ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中睪酮、細(xì)胞內(nèi)P450scc、3β-HSD的含量,并運(yùn)用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)的方法檢測(cè)Leydig細(xì)胞P450scc、3β-HSDmRNA的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:

2、與對(duì)照組相比,在設(shè)計(jì)劑量范圍內(nèi),隨著染壬基酚劑量加大,細(xì)胞培養(yǎng)上清液中睪酮的含量逐漸降低,1、10μmol/L時(shí),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p＜0.05。細(xì)胞內(nèi)3β-HSD含量不斷降低,1、10μmol/L,細(xì)胞內(nèi)該酶的降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p＜0.05。3β-HSDmRNA的表達(dá)水平降低,10μmol/L時(shí),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p＜0.05。細(xì)胞內(nèi)P450scc的含量及P450sccmRNA的表達(dá)水平均隨染壬基酚劑量升高而不斷升高,10μmol/L時(shí),有統(tǒng)