2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景:
  心肌細(xì)胞凋亡是心血管疾病心室重塑的基本病理基礎(chǔ),炎癥在其中可能起重要作用,但機(jī)制仍未闡明。IL-17A是一種新的炎性細(xì)胞因子,目前有關(guān)其在心血管疾病中的作用尚存在分歧。Stat3是IL-17A下游的轉(zhuǎn)錄因子,并在調(diào)控細(xì)胞凋亡方面起重要作用;iNOS作為IL-17A調(diào)控表達(dá)的下游蛋白,對(duì)細(xì)胞凋亡的作用存在爭議。我們推測,IL-17A可能通過Stat3/iNOS參與心肌細(xì)胞凋亡。
  方法:
  應(yīng)用體外培養(yǎng)的

2、新生小鼠心肌細(xì)胞,觀察IL-17A刺激后心肌細(xì)胞凋亡指標(biāo)變化:應(yīng)用TUNEL染色檢測心肌細(xì)胞凋亡情況,Western blot檢測cleaved caspase3等凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá);應(yīng)用免疫熒光染色、RT-PCR、Western blot測定Stat3、iNOS等相關(guān)因子的表達(dá)。同時(shí),應(yīng)用Stat3 shRNA腺病毒干擾技術(shù),降低心肌細(xì)胞Stat3表達(dá),進(jìn)一步闡明Stat3在IL-17A介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡中的作用。
  結(jié)果:<

3、br>  培養(yǎng)的新生小鼠心肌細(xì)胞表達(dá)IL-17F及其受體——IL-17RA、RC,但不表達(dá)IL-17A; IL-17A對(duì)iNOS表達(dá)具有顯著時(shí)效及量效關(guān)系,100ng/ml IL-17A刺激24小時(shí),iNOS表達(dá)水平最高(p<0.01);100ng/ml IL-17A導(dǎo)致小鼠心肌細(xì)胞Stat3磷酸化,在15-30分鐘Stat3磷酸化水平最高(p<0.01),1小時(shí)后磷酸化水平逐漸降低,總STAT3表達(dá)無明顯差異;與對(duì)照組比較,100ng

4、/ml IL-17A刺激小鼠心肌細(xì)胞24小時(shí)后,TUNEL染色陽性細(xì)胞數(shù)顯著增多(P<0.01),cleaved caspase3表達(dá)增加(P<0.01),但Bcl-2/Bax比值無明顯差異;Stat3 shRNA腺病毒感染心肌細(xì)胞,與空載病毒組相比,IL-17A+空載病毒組及IL-17A+Stat3 shRNA病毒組iNOSmRNA表達(dá)均增加(P<0.01),且后者iNOS mRNA表達(dá)量顯著高于前者(P<0.01);同時(shí),與空載病毒

5、組相比,IL-17A+空載病毒組IL-17F mRNA表達(dá)增加(P<0.01);Stat3 shRNA病毒組及IL-17A+Stat3 shRNA病毒組則顯著抑制IL-17F mRNA表達(dá)(P<0.01),兩者之間無顯著差異;與空載病毒組相比,IL-17A+空載病毒組cleavedcaspase3表達(dá)無顯著差異,Stat3 shRNA病毒組總Stat3表達(dá)明顯降低,cleavedcaspase3表達(dá)增加(P<0.05),IL-17A+S

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