南高叢越橘品種“V3”(Vaccinium austral)四倍體誘導及鑒定.pdf

1、越橘（VacciniumL.），杜鵑花科(Ericaceae)越橘屬(Vaccinium)多年生灌術性植物，是原產(chǎn)北美的多年生果樹。越橘單葉互生，常為卵圓形，北方多數(shù)種落葉，部分南方地區(qū)種常綠。越橘果實顏色、大小因為品種不同而有差異;在自然條件下，越橘生長在含有豐富有機質(zhì)的微酸性土壤中。
　　 南高叢越橘原產(chǎn)美國東南部亞熱帶，喜溫暖濕潤的氣候條件，在我國黃河以南的華中、華南地區(qū)發(fā)展較多，其栽培品種較少。本試驗的南高叢越橘品種“V

2、3”二倍體材料引種重慶多年，生長迅速，抗性強，病蟲害少，果實品質(zhì)佳，鮮食口感好，但果實較小，產(chǎn)量受限。而多倍體植物一般生長健壯、果實巨大、抗逆性強，本研究試圖通過秋水仙素處理南高叢越橘品種“V3”二倍體材料，從而得到多倍體。為培育大果型南高叢越橘新品種奠定基礎。
　　 本試驗以南高叢越橘品種“V3”組培無菌苗作為材料，選用化學藥劑秋水仙素對越橘苗莖尖進行四倍體誘變，研究室外生長點滴液法和離體誘導法兩種誘導方法中不同處理方式對南高

3、叢越橘品種“V3”莖尖的誘導效果，從而確定不同方法中秋水仙素誘變的最佳處理濃度和時間。通過形態(tài)觀察法和染色體計數(shù)對所獲得的變異株進行倍性鑒定。獲得的變異株均為嵌合體，對其進行分離可獲得南高叢越橘品種“V3”的四倍體植株。對經(jīng)過染色體鑒定后的四倍體植株的生物學特性、抗逆性、花青素含量與二倍體對照植株進行差異性比較，可以為今后培育果實巨大、抗逆性強的越橘新品種提供理論依據(jù)。
　　 主要研究結(jié)果如下:
　　 1.在室外生長點滴

4、液法中，以秋水仙素處理南高叢越橘品種“V3”莖尖，研究結(jié)果表明:0.05％～0.20％的濃度范圍內(nèi)，越橘栽植苗莖尖對秋水仙素的敏感度較高，以0.20％秋水仙素濃度處理24h效果最好，存活率為83.33％，變異率為6.67％。
　　 2.離體誘導法
　　 (1)以增殖系數(shù)作為不同激素濃度增殖能力的指標，確定最適宜的ZT激素濃度，結(jié)果表明:在改良后的WPM培養(yǎng)基中添加濃度為0.20mg/L的ZT激素，增殖系數(shù)最大為8.0。<

5、br>　　 (2)莖尖浸泡法誘變效果優(yōu)于培養(yǎng)基添加法，結(jié)果表明:浸泡法中0.10％秋水仙素濃度處理24h效果最好，變異率為16.67％，培養(yǎng)基添加法中在秋水仙素濃度為0.30％的培養(yǎng)基中處理莖尖20d，莖尖的變異率最高，為6.67％。
　　 3.經(jīng)過秋水仙素處理后植株，通過外部形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn):變異株莖桿變粗、顏色加深，新長出的莖尖周圍葉片數(shù)增加、莖尖顏色發(fā)紅、表皮毛增多、葉片變厚、葉色加深、保衛(wèi)細胞明顯增大、單位面積內(nèi)氣孔數(shù)目減

6、少、柵欄組織和海綿組織厚度增加。
　　 4.根據(jù)越橘莖桿的橫切片觀察發(fā)現(xiàn):變異株莖段表皮細胞、角質(zhì)膜、皮層厚角組織增厚;初生韌皮部與二倍體對照株相比，顯著增加。變異株的初生木質(zhì)部和髓射線數(shù)量增多，髓的面積明顯增加。變異株初生韌皮部厚度和髓直徑是二倍體植株的328％、218％。
　　 5.染色體數(shù)目計數(shù)結(jié)果表明:二倍體對照株染色體數(shù)目為24條，2n=2x=24，變異株為嵌合體植株，染色體數(shù)目既有24條也有48條，四倍體植株

7、染色體數(shù)目為48條，2n=2x=48。
　　 6.南高叢越橘品種“V3”四倍體與二倍體植株的植株葉綠素、MDA、SOD、可溶性糖、脯氨酸生理指標比較結(jié)果顯示:四倍體植株較二倍體植株生理指標含量方面有較顯著變化。四倍體葉綠素含量、SOD、可溶性糖、脯氨酸均高于二倍體，丙二醛低于二倍體。四倍體葉片含水量略高于二倍體。
　　 7.通過溶劑浸提法和酶提法對南高叢越橘品種“V3”四倍體與二倍體植株的葉片、莖桿進行花青素提取。結(jié)果表