鷺科鳥類性別鑒定方法及白鷺和黃嘴白鷺雛鳥種群性別比例的研究.pdf

1、本實驗在篩選鷺科鳥類性別鑒定分子標(biāo)記的基礎(chǔ)上，利用這種方法檢測白鷺和黃嘴白鷺雛鳥種群的性別比例，分析白鷺和黃嘴白鷺的雛鳥性別與產(chǎn)卵順序之間的關(guān)系，并進(jìn)一步分析鷺科鳥類W染色體以及Z染色體的CHD片段序列并嘗試用于親緣關(guān)系及系統(tǒng)進(jìn)化的研究。 本文以鸛形目5種鷺科鳥類和1種科鳥類的組織為實驗材料，采用PCR方法擴增其性別基因相關(guān)片段，探討鷺科鳥類性別的分子鑒定方法。通過測定3對已知性別的白鷺(Egretta garzetta)、巖鷺

2、(Egretta sacra)和黃嘴白鷺(Egrettaeulophotes) 以及12只未知性別的夜鷺(Nycticorax nycticorax)、池鷺(Ardeolabacchus)、白鷺、牛背鷺(Bubulcus ibis)、黑臉琵鷺(Pla組lea minor)的性別基因EE0.6或CHD上的基因相關(guān)片段并進(jìn)行比較。結(jié)果表明，通過擴增EE0.6或CHD基因片段的性別鑒定分子方法都能夠適用于鷺科鳥類的性別鑒定，由此能夠解決鷺科鳥

3、類雌雄外形同色而難以從外貌上區(qū)分其性別的問題；在EE0.6和CHD兩種鷺類性別鑒定方法中，CHD方法不僅準(zhǔn)確而且比EE0.6方法更為簡單。 本文利用引物P2、P8通過擴增CHD基因特定片段鑒定了三地共361只個體的性別，對擴增條帶不明顯的個體利用引物255OF、2718R進(jìn)行校正。結(jié)果表明，白鷺雛鳥種群(雞嶼島，共69只)的性別比例具明顯的雌性偏向(雌性比例為0.6522±0.4798(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)，P<0.05)；黃嘴白鷺

4、雛鳥種群(杏仁砣和小菜嶼，共213只)的性別比例沒有明顯的性別偏向(雌性比例為0.4507±0.4987，P>0.05)，其中，杏仁砣黃嘴白鷺種群雛鳥(154只)的性別比例沒有明顯的性別偏向(雌性比例為0.5130±0.5015，P>0.05)，而小菜嶼黃嘴白鷺雛鳥種群(59只)的性別比例則有明顯的雄性偏向(雌性比例為0.2881±0.4568(mean±SD)，P<0.01)。按巢統(tǒng)計的性別比例(巢內(nèi)性別比例)與種群性別比例的結(jié)果相似

5、。白鷺(17巢雞嶼島)的巢內(nèi)性別比例具明顯的雌性偏向(0.6333±0.2756，P<0.05)，黃嘴白鷺(杏仁砣+小菜嶼共65巢)的巢內(nèi)性別比例無明顯的性別偏向(0.4648±0.3108，P>0.05)；其中，杏仁砣黃嘴白鷺(45巢)的巢內(nèi)性別比例無明顯的性別偏向(0.5571±0.2941，P>0.05)；但是小菜嶼黃嘴白鷺(20巢)的巢內(nèi)性別比例具明顯的雄性性別偏向(0.2708±0.2485，P<0.01)。比較三地種群的雌性

6、比例關(guān)系為白鷺(雞嶼)>黃嘴白鷺(杏仁砣+小菜嶼)(P<0.01)，雞嶼島白鷺>杏仁砣黃嘴白鷺(P>0.05)，雞嶼島白鷺>小菜嶼黃嘴白鷺(P<0.05)，杏仁砣黃嘴白鷺>小菜嶼黃嘴白鷺(P<0.01)；三地巢內(nèi)雌性比例關(guān)系為(雞嶼)>黃嘴白鷺(杏仁砣+小菜嶼)(P<0.05)，雞嶼島白鷺>杏仁砣黃嘴白鷺(P)0.05)，雞嶼島白鷺>小菜嶼黃嘴白鷺(P<0.01)，杏仁砣黃嘴白鷺>小菜嶼黃嘴白鷺(P<0.01)。 本文還探討白鷺

7、和黃嘴白鷺的產(chǎn)卵順序與雛鳥性別之間的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，白鷺(雞嶼島)第一至第五枚卵的雌性比例分別為0.556±0.511(n=17)，0.778±0.428(n=17)，0.611±0.502(n=17)，0.463±0.497(n=13)和1.000(n=1)。黃嘴白鷺(杏仁砣+小菜嶼)第一至第五枚卵的雌性比例分別是0.403±0.494(n=68)，0.508±0.504(n=62)，0.482±0.504(n=48)，0.539±0

8、.508(n=22)，1.000(n=3)。在黃嘴白鷺的兩個種群當(dāng)中，杏仁砣黃嘴白鷺第一至第五枚卵的雌性比例分別為0.438±0.501(n=45)，0.652±0.482(n=42)，0.595±0.498(n=34)，0.565±0.507(n=20)，1-000(n=3)；小菜嶼黃嘴白鷺第一到第四枚卵的雌性比例分別是0.333±0.476(n=23)，0.158±0.375(n=20)，0.235±0.437(n=14)，0.5±

9、0.577(n=2)?？梢姡矁?nèi)窩卵數(shù)為5枚的白鷺和黃嘴白鷺的最后一枚卵都是雌性。除了白鷺(雞嶼島)第四枚卵的雌性比例<杏仁砣+小菜嶼黃嘴白鷺(P>0.05)或杏仁砣黃嘴白鷺(P>0.05)或小菜嶼黃嘴白鷺(P>0.05)以外，第一、三枚卵的雌性比例都是白鷺>黃嘴白鷺(杏仁砣+小菜嶼)(P>0.05)或杏仁砣黃嘴白鷺(P>0.05)或小菜嶼(P<0.05)，而杏仁砣黃嘴白鷺第一到第四枚卵的雌性比例都大于小菜嶼黃嘴白鷺(P<0.05)。雞

10、嶼島白鷺和杏仁砣黃嘴白鷺都是第二枚卵的雌性比例最高，而小菜嶼黃嘴白鷺第二枚卵的雌性比例最低。 本文最后對黃嘴白鷺、牛背鷺和黑臉琵鷺的W染色體上擴增的CHD片段，以及黃嘴白鷺、大白鷺、中白鷺、牛背鷺、夜鷺和黑臉琵鷺Z染色體上擴增的CHD片段進(jìn)行序列分析并用于親緣關(guān)系及系統(tǒng)進(jìn)化的研究。發(fā)現(xiàn)引物P2、P8擴增的CHD-W基因的片段較為保守，而擴增的CHDWZ基因片段變異較大，而且在對黃嘴白鷺的性別鑒定過程中發(fā)現(xiàn)Z染色體長度多態(tài)現(xiàn)象。因

11、此，這些片段不適于作為親緣關(guān)系和系統(tǒng)進(jìn)化研究的分子標(biāo)記。 綜上所述，本文建立了鷺科鳥類的快速、簡單、準(zhǔn)確的性別鑒定方法，解決了鷺科鳥類雛鳥不能利用外部形態(tài)進(jìn)行性別準(zhǔn)確辨別的難題。本研究顯示，白鷺種群的性別比例和巢內(nèi)性別比例具明顯的雌性偏向(P<0.05)，白鷺的種群性別比例和巢內(nèi)性別比例(雌性比例)大于黃嘴白鷺(P<0.05)，該結(jié)果可能是解釋白鷺種群繁殖力和增長速度大于黃嘴白鷺的原因之一。白鷺的種群性別比例和巢內(nèi)性別比例(雌性