糖的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及體外抗氧化活性研究.pdf

1、本文以海藻裙帶菜為原料、對裙帶菜硫酸多糖的提取、分離純化、理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)分析、體外抗氧化活性等方面進行了較為系統(tǒng)的研究，結(jié)果如下：
　　 1.本研究采用酸提醇沉的方法進行提取，先用稀鹽酸(pH=2)浸泡，再在60℃中浸提6h, 提取兩次，加入90％乙醇，靜置過夜，真空干燥，得裙帶菜粗多糖。此條件下粗多糖得率為2.4％。粗多糖經(jīng)鏈酶蛋白酶及Sevag法脫蛋白后，蛋白脫除率88.5％, 脫蛋白后的蛋白含量僅為1.51％。 然后經(jīng)DE

2、AE-Sephadex A-25離子交換柱分離，用0-2M NaCl溶液進行連續(xù)梯度洗脫，分部收集，苯酚-硫酸檢測多糖含量，通過該實驗來確定適宜的NaCl濃度，再用階段洗脫方法進行大量制備樣品，得到裙帶菜硫酸多糖兩種組分S1、S2，而后再經(jīng)Superdex-200、Sephacryl S-300柱層析兩種方法進行純度鑒定，苯酚硫酸法跟蹤檢測，所得峰形單一、狹窄對稱，說明S1、S2已是均一化的多糖。
　　 2.裙帶菜硫酸多糖（S1

3、、S2）的性質(zhì)研究。通過苯酚硫酸法、硫酸咔唑法、考馬斯亮蘭法、凝膠過濾法、玫瑰紅酸鈉等方法對其理化性質(zhì)進行分析測定。結(jié)果如下：總糖含量分別為40.54％、33.50％，糖醛酸含量為12.97％、9.98％，蛋白含量為1.39％、1.41％，分子量為150000、94620，硫酸根含量高達34.29％、33.99％，是高度硫酸化的多糖。本研究采用溶劑解離的方法對其做了脫硫酸化處理得脫硫酸化多糖（DS-1、DS-2），跟蹤檢測顯示其硫酸根含

4、量顯著下降，硫酸根脫除率為82％。
　　 3.裙帶菜硫酸多糖的結(jié)構(gòu)研究。通過氣相色譜法，紅外光譜法、氣質(zhì)聯(lián)用等手段對S1、S2的結(jié)構(gòu)進行了初步研究。結(jié)果如下：S1、S2均由鼠李糖（Rha）、半乳糖(Gal)、木糖（Xyl）、葡萄糖醛酸(GlcA)組成，但兩者的摩爾比不同，其中鼠李糖(Rha)的含量最大，摩爾比分別達到51.44mol％、40.30mol％，其次還含有半乳糖和木糖，并含有少量葡萄糖醛酸, 故可將S1、S2命名為裙帶

5、菜硫酸化異鼠李聚糖。紅外光譜結(jié)果顯示其具有硫酸基及羧基的特征吸收峰，這與理化性質(zhì)所測的結(jié)果是一致的。GC-MS結(jié)果分析表明S1的末端基有鼠李糖、木糖、葡萄糖（葡萄糖醛酸經(jīng)CMC還原得到），主體部分鼠李糖以1→2連接，并且在4-O處有分支；木糖以1→4，且在2-O位有分支；半乳糖以1→3連接，且在6-O 有分支。
　　 4.體外抗氧化活性研究表明：裙帶菜硫酸多糖具有良好的清除超氧陰離子自由基、羥基自由基、有機自由基DPPH及對Fe