PAI-1和vitronectin在慢性移植物賢損傷中的表達(dá)及致纖維化作用的初步探討.pdf

1、慢性移植物腎損傷(CAI)是造成移植物失功最主要的原因。腎臟的慢性纖維化是以小球及小管間質(zhì)中細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的過度積聚為典型表現(xiàn)。在一些慢性腎臟病中發(fā)現(xiàn),1型纖溶酶原激活劑抑制物(PAI—1)和玻璃粘連蛋白(vitronectin)可能通過相互結(jié)合的方式參與了基質(zhì)的降解,促進(jìn)小球的硬化和間質(zhì)的纖維化。而在人慢性移植物。腎損害中,國內(nèi)外尚未有證實(shí)PAI-1通過與vitronectin相互結(jié)合的方式促進(jìn)非特異性的纖維化的報(bào)道。本文旨在通

2、過免疫組化的方法,進(jìn)一步觀察在人慢性移植物腎損害的標(biāo)本中,是否存在PAI-1與vitronectin表達(dá)的共同上調(diào),并通過相互結(jié)合的方式發(fā)揮其致纖維化的機(jī)制。本研究可為近一步尋找阻斷移植腎纖維化過程的治療途徑提供理論依據(jù)。
　　 方法
　　 入選24例腎移植術(shù)后患者,分為正常對照組(8例)、急性排異組(AR組)(8例)、CAI組(8例)。免疫組化法檢測PAI—1,vitronectin以及PAI-1和vitronecti

3、n的雙重染色。對正常對照組和CAI組的標(biāo)本都進(jìn)行PAN及masson染色,觀察小球硬化、基質(zhì)增生、小管萎縮、間質(zhì)纖維化的情況,收集正常對照組及CAI組的基本臨床資料,包括年齡、體重、腎穿時(shí)肌酐情況,根據(jù)CG公式計(jì)算其Ccr。隨訪兩組腎穿后至少9個(gè)月的肌酐情況。結(jié)果采用半定量面積計(jì)數(shù)法。所有數(shù)據(jù)采用直線相關(guān)分析、t檢驗(yàn)等進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。P<0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果
　　 PAI-1在正常對照組中僅極少量的表

4、達(dá)(小球6.35±2.90,間質(zhì)3.53±2.20),與正常對照組相比,PAI-1在AR組、CAI組都有表達(dá)上調(diào)(小球中分別為28.66±4.70,49.10±6.51；間質(zhì)中分別是8.81±2.20,15.13±1.45),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CAI組中的表達(dá)顯著高于AR組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的差異(P<0.05)。Vitronectin在正常對照組中已有大量表達(dá)(小球21.14±1.80,間質(zhì)3.95±1.46),與AR組(小球

5、28.44±9.46,間質(zhì)5.53±1.83)相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。CAI組(小球42.30±8.23,間質(zhì)12.29±2.36)顯著高于其他兩組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。PAS染色結(jié)果,CAI組腎小球硬化指數(shù)(2.80±0.49)與正常對照組(0.91±0.23)相比,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。CAI組腎小球ECM面積/腎小球面積值(0.50±0.07)與正常對照組(0.14±0.03)相比,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(

6、P<0.01)。PAI-1半定量計(jì)數(shù)值與腎小球ECM面積/腎小球面積值呈直線正相關(guān)(R=0.944,P<0.01),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。vitronectin半定量計(jì)數(shù)值與腎小球ECM面積/腎小球面積值呈直線正相關(guān)(R=0.815,P<0.01),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Masson染色結(jié)果,CAI組間質(zhì)纖維化評分(2.50±0.27)與正常對照組(0.44±0.22)相比,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。CAI組小管損傷評分(2.49±0.29)

7、與正常對照組(0.65±0.32)相比,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。PAI-1半定量計(jì)數(shù)值與vitronectin半定量計(jì)數(shù)值兩者呈直線正相關(guān),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(R=0.826,P<0.01)。雙重染色結(jié)果顯示,在CAI組標(biāo)本中,觀察到PAI-1與vitronectin兩者在小球系膜區(qū)及小管間質(zhì)處廣泛共表達(dá)。腎臟局部PAI-1、vitronectin與患者的肌酐值呈線性正相關(guān),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(R=0.858,P<0.01及R=0.860

8、,P<0.01)；兩者與患者的Ccr呈線性負(fù)相關(guān),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(R=-0.730,P<0.01及R=-0.708,P<0.05)。在腎穿后9個(gè)月的隨訪中,PAI-1高表達(dá)組Scr。都顯著高于PAI-1低表達(dá)組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01),且在隨訪第6及第9個(gè)月時(shí),PAI—1高表達(dá)組分別發(fā)生1例因移植腎不可逆的纖維化導(dǎo)致移植物失功的不良事件。
　　 結(jié)論
　　 PAI-1及vitronectin在慢性移植物腎損傷纖維化