豬繁殖與呼吸綜合征病毒通過囊膜蛋白E激活豬肺泡巨噬細(xì)胞炎性體.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征（Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome，PRRS）是PRRS病毒(PRRSV)引起的以繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)疾病為特征的一種急性傳染病，是目前危害養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的最為重要傳染病之一。豬感染PRRSV后可引起豬肺和胎盤組織嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)，這是PRRSV引起感染豬呼吸與繁殖障礙的重要致病原因。已知PRRSV主要感染豬的巨噬細(xì)胞，特別是肺泡巨噬細(xì)胞(PAMs)。組織中的巨噬細(xì)胞在介導(dǎo)PR

2、RSV侵染、增殖和炎性反應(yīng)起重要作用。然而PRRSV感染巨噬細(xì)胞如何引起嚴(yán)重的組織炎性反應(yīng)，目前尚不完全清楚。近十年來研究發(fā)現(xiàn)，由單核/巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的組織炎性反應(yīng)與炎性體(Inflammasome)的激活有關(guān)。炎性體是單核/巨噬細(xì)胞內(nèi)由感受外來病原或細(xì)胞內(nèi)危險(xiǎn)信號(hào)的模式識(shí)別受體與caspasel組成的復(fù)合體，復(fù)合體中的caspasel可催化白細(xì)胞介素1β(IL-1β)前體和IL-18前體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓腎L-1β和IL-18并釋放到細(xì)胞外，

3、IL-1β是介導(dǎo)組織炎癥的重要細(xì)胞因子。PRRSV感染巨噬細(xì)胞是否通過激活炎性體，促進(jìn)IL-1β的成熟與釋放，進(jìn)而引起組織嚴(yán)重的炎性反應(yīng)，目前尚不清楚。
　　 因此，為了證明PRRSV感染豬肺泡巨噬細(xì)胞是否激活巨噬細(xì)胞的炎性體，促進(jìn)IL-1β的成熟與釋放，進(jìn)而引起組織嚴(yán)重的炎性反應(yīng)。我們首先用PRRSV感染用脂多糖(LPS)刺激的肺泡巨噬細(xì)胞，測(cè)定感染后細(xì)胞培養(yǎng)基中IL-1β和IL-18的含量，結(jié)果表明，PRRSV感染均可明顯提

4、高LPS刺激的和未刺激的巨噬細(xì)胞IL-1β和IL-18釋放量，表明PRRSV可引起豬肺和胎盤組織的炎癥反應(yīng)與PRRSV激活巨噬細(xì)胞炎性體有關(guān)。有研究報(bào)道，流感病毒編碼的孔道蛋白M2可促進(jìn)病毒粒子的釋放和激活單核/巨噬細(xì)胞的炎性體，從而介導(dǎo)組織的炎性反應(yīng)。由于PRRSV的囊膜蛋白E也是一個(gè)孔道蛋白，和病毒粒子的釋放有關(guān)，因此我們推測(cè)PRRSV囊膜蛋白E與PRRSV激活肺泡巨噬細(xì)胞炎性體有關(guān)。為證明這一推測(cè)，我們首先利用mRNA介導(dǎo)法將體外