血管內(nèi)皮生長因子對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外受精的影響.pdf

1、在培養(yǎng)液中添加各種生長因子常被用于優(yōu)化哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞體外受精培養(yǎng)體系。研究表明，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)支持動(dòng)物配子的發(fā)生、生長和發(fā)育，對(duì)動(dòng)物卵母細(xì)胞體外受精有積極影響。本研究探討了VEGF對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟、受精和早期胚胎發(fā)育的影響，旨在優(yōu)化水牛卵母細(xì)胞體外受精培養(yǎng)體系，進(jìn)一步提高水牛體外胚胎生產(chǎn)效率。本研究包括三個(gè)試驗(yàn)。
　　 試驗(yàn)一，檢驗(yàn)卵丘細(xì)胞對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外受精的影響，研究胞質(zhì)輕微變形的受精卵的發(fā)育潛能，并

2、初步試驗(yàn)VEGF對(duì)水牛配子發(fā)育潛能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)卵丘細(xì)胞去除組受精卵的卵裂率和囊胚率極顯著高于保留組(55.14％、20.38％ vs.21.44％、3.68％，P＜0.01);(2)細(xì)胞質(zhì)輕微變形的受精卵卵裂率和囊胚率略高于細(xì)胞質(zhì)形態(tài)正常組，但差異均不顯著(59.96％、20.13％ vs.48.59％、18.86％，P＞0.05);(3)卵母細(xì)胞成熟培養(yǎng)液中添加10 ng/mL VEGF時(shí)，受精卵的卵裂率顯著高于對(duì)照組(0

3、 ng/mLVEGF)(54.36％ vs.41.84％，P＜0.05);受精液中添加10 ng/mL VEGF時(shí)，受精卵的卵裂率極顯著高于對(duì)照組(64.28％ vs.43.40％，P＜0.01)。以上結(jié)果表明:(1)水牛成熟卵母細(xì)胞去除卵丘細(xì)胞的體外受精效果較好;(2)細(xì)胞質(zhì)輕微變形的受精卵仍具有較好的發(fā)育潛能;(3) VEGF能提高水牛卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能和精子的受精能力。
　　 試驗(yàn)二，探討不同濃度的VEGF(0、1、10、

4、100 ng/mL)對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)各處理組卵丘擴(kuò)展指數(shù)均高于對(duì)照組，但各組間差異不顯著(2.83、2.68、2.65 vs.2.61，P＞0.05);(2)10 ng/mLVEGF處理組的成熟率顯著高于對(duì)照組(72.30％ vs.57.30％,P＜0.05);1ng/mL和100 ng/mL組的成熟率也高于對(duì)照組，但差異不顯著(67.18％、60.58％ vs.57.30％，P＞0.05);(3)各處理組

5、的卵裂率均高于對(duì)照組，其中10 ng/mL組卵裂率顯著高于1 ng/mL組和對(duì)照組(53.27％ vs.41.60％、40.97％，P＜0.05)。以上結(jié)果表明:(1)VEGF對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟有積極影響;(2) VEGF不僅能促進(jìn)水牛卵母細(xì)胞的核成熟，還能提高卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能。
　　 試驗(yàn)三，探討在受精液中添加不同濃度的VEGF(0、1、10、100 ng/mL)對(duì)水牛精子受精能力的影響。結(jié)果顯示，10 ng/mL和10

6、0 ng/mL VEGF處理組的卵裂率均極顯著高于對(duì)照組(63.04％、56.26％ vs.41.92％，P＜0.01)，1ng/mL組的卵裂率也顯著高于對(duì)照組(55.16％vs.41.92％，P＜0.05);10 ng/mL組的囊胚率顯著高于對(duì)照組(32.62％vs.17.00％，P＜0.05)。
　　 在前期研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，同時(shí)在成熟培養(yǎng)液和受精液中添加10ng/mL VEGF，研究其對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外受精胚胎發(fā)育的影響，

7、處理組的卵裂率和囊胚率均極顯著高于對(duì)照組(64.28％、27.22％ vs.43.40％、19.02％，P＜0.01)，且處理組的囊胚細(xì)胞數(shù)顯著高于對(duì)照組(106.83 vs.89.50，P＜0.05)。以上結(jié)果表明，VEGF能促進(jìn)水牛卵母細(xì)胞體外受精和早期胚胎發(fā)育，并且能提高胚胎質(zhì)量。
　　 總之，VEGF對(duì)水牛體外胚胎生產(chǎn)有積極影響，可用于優(yōu)化水牛體外受精培養(yǎng)體系。本研究中，以添加10 ng/mL VEGF對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外