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文檔簡介
1、目的:
探討人甲狀腺乳頭癌組織及外周血中 TSHR蛋白、TSHR-mRNA的表達與BRAFV600E基因突變的關系。
方法:
收集122例甲狀腺乳頭狀癌患者的正常對照甲狀腺及其腫瘤組織,對入組所有患者的腫瘤組織進行BRAF基因V600 E點突變檢測(PCR法);應用“免疫組化”法檢測入組所有甲狀腺乳頭狀癌患者組織標本中TSHR蛋白的表達情況;隨機選擇BRAF V600E基因突變組、BRAF V600E基因野
2、生組及正常對照甲狀腺組織各20例,應用“Western-blot”方法對免疫組化結論進行驗證;進一步應用“RT-PCR”方法檢測BRAF V600E基因突變組、BRAFV600E基因野生組及正常對照甲狀腺組織(各10例)中TSHR-mRNA的相對表達量;再收集70例甲狀腺乳頭狀癌患者及34例甲狀腺良性疾病患者手術前和手術后外周血及11例健康志愿者的外周血全血樣本,應用RT-PCR法檢測入組患者外周血中TSHR-mRNA表達水平;應用SP
3、SS17.0統(tǒng)計學軟件分析甲狀腺乳頭狀癌組織及外周血中TSHR及其 mRNA的表達與 BRAFV600E基因突變的關系。
結果:
甲狀腺乳頭狀癌組織中TSHR蛋白及TSHR-mRNA的表達水平均較正常對照組明顯降低,且在甲狀腺乳頭狀癌患者中,BRAF V600E基因突變型者較 BRAF V600E基因野生型者的TSHR蛋白及TSHR-mRNA的表達水平也明顯降低;在甲狀腺乳頭狀癌患者外周血中,術前 TSHR-mRNA
4、表達水平顯著高于甲狀腺良性病變組及健康對照組,且在手術后1天降至正常水平;在不同BRAFV600E基因型的甲狀腺乳頭狀癌患者中 BRAFV600E基因突變型患者術前外周血 TSHR-mRNA水平顯著高于BRAFV600E基因未突變者。
結論:
BRAFV600E基因突變影響甲狀腺乳頭狀癌TSHR的表達,使腫瘤組織中TSHR蛋白及其 mRN A表達水平下調;TSHR-mRNA作為甲狀腺乳頭狀癌患者循環(huán)腫瘤標志物,其釋放
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