菊花不同種質(zhì)及組織DNA甲基化差異分析.pdf

1、充分利用各種分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)菊花品種進(jìn)行鑒定,是菊花種質(zhì)資源保存和育種的基礎(chǔ)。DNA甲基化是一種重要的DNA修飾方式,在基因的表達(dá)調(diào)控中起著重要的作用。植物生長(zhǎng)過(guò)程中CCGG位點(diǎn)常會(huì)發(fā)生5-mC的變化,進(jìn)而調(diào)控基因的表達(dá)。因此,本研究采用AFLP和MSAP兩種DNA分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)中國(guó)開(kāi)封地區(qū)12個(gè)菊花品種,進(jìn)行了遺傳與表觀遺傳多樣性的分析,并對(duì)這兩種分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行了比較。同時(shí),取菊花盛花期葉片、腳芽、舌狀花三個(gè)部位DNA進(jìn)行了CCGG

2、位點(diǎn)甲基化檢測(cè)。主要研究結(jié)果如下:
　　利用AFLP分子標(biāo)記,對(duì)12個(gè)菊花品種的遺傳多樣性進(jìn)行分析,6對(duì)引物組合總共獲得306條譜帶(位點(diǎn)),平均每對(duì)引物51條。每對(duì)引物的多態(tài)性譜帶百分率從53.7％到77.2%。6對(duì)引物共發(fā)現(xiàn)多態(tài)性位點(diǎn)208個(gè),占總譜帶的67.9%,證明AFLP應(yīng)用于菊花品種鑒定,多態(tài)性較高,不同菊花品種DNA序列差異較大。
　　利用MSAP標(biāo)記分析菊花DNA,結(jié)果顯示不同菊花品種總甲基化程度差異不大,在

3、20.1%~26.1%之間。DNA全甲基化比例范圍在7.7%~13.7%。而且不同組織部位甲基化變異模式具有品種特異性。16對(duì)引物中4對(duì)引物多態(tài)性較高,可以區(qū)分不同菊花品種。與AFLP相比MSAP多態(tài)性較低但相差不大,說(shuō)明其可以用于菊花品種的鑒定,MSAP技術(shù)更適合基因組序列相似但是表型不同或者同一品種不同部位DNA甲基化信息的鑒定。
　　對(duì)于菊花不同部位MSAP檢測(cè)發(fā)現(xiàn),這些甲基化狀態(tài)的變化表現(xiàn)為三種類型:A型,去甲基化;B型,