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文檔簡介
1、植物內生真菌是指在生活史中的某一個階段存在于健康植物組織內部,不會引起宿主明顯病癥或者對宿主造成明顯傷害的真菌。
丹參是雙子葉植物唇形科鼠尾草屬多年生直立草本植物,是一種常用的藥用植物,具有活血祛瘀,通經止痛,清心除煩,涼血消癰之功效;三尖杉是一種常綠喬木,亞熱帶特有植物,產于浙江、安徽南部、福建、江西、湖南等省區(qū),具有驅蟲,消積,抗癌的功能,用于治療咳嗽,食積,蛔蟲、鉤蟲病。而次生代謝產物是指某些微生物生長到穩(wěn)定期前后,以結
2、構簡單、代謝途徑明確、產量較大的初生代謝物為前體,通過復雜的次生代謝途徑所合成的各種結構復雜的化合物。目前大量的研究表明內生真菌次生代謝產物種類豐富、結構新穎、生物活性多樣,是一座為人類提供生物活性物質的寶庫。本課題組致力于藥用植物內生真菌生物多樣性、化學多樣性和宿主相關性的研究。在前期研究中,課題組從丹參和三尖杉中分別分離并鑒定出了深綠木霉菌,分別編號為D16和S361,其中D16能產生丹參酮Ⅰ和丹參酮ⅡA,而在S361次生代謝產物中
3、并沒有發(fā)現丹參酮類的物質。查閱文獻后發(fā)現,有報道顯示在不同宿主中生長的其它屬的同種內生真菌能產生和宿主活性成分類似的次生代謝產物,猜想在D16和S361的次生代謝產物中是否也會出現類似的現象。
本文對分離自浙江省建德市三尖杉的深綠木霉菌株(Trichoderma atroviride S361)和分離自陜西商洛丹參的深綠木霉菌株(Trichoderma atroviride D16)進行了系統(tǒng)的次生代謝產物及其生物學活性研究。
4、
采用大米培養(yǎng)基對D16菌株進行發(fā)酵培養(yǎng),采用硅膠柱色譜、ODS柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜等方法對其發(fā)酵培養(yǎng)物中的次生代謝產物進行分離純化,采用各種波譜數據(NMR,MS,IR,CD)以及文獻對照等手段進行鑒定,共分離鑒定化合物17個,包括3個新化合物(3個倍半萜類的化合物)和14個已知化合物(包括了5個酯類化合物,2個酸類化合物,1個酚類化合物,1個醇類化合物,1個酮類化合物,3個倍半
5、萜的化合物,1個二萜類化合物)。
采用大米培養(yǎng)基對S361菌株進行發(fā)酵培養(yǎng),采用硅膠柱色譜、OD柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜儀等方法對其發(fā)酵培養(yǎng)物中的次生代謝產物進行分離純化,采用各種波譜數據(NMR,MS,IR,CD)以及文獻對照等手段進行鑒定,共分離鑒定化合物16個,包括4個新化合物(2個酰胺類的化合物,1個倍半萜類的化合物,1個二萜類的化合物)和12個已知化合物(包括了3個內脂類的化
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