常染色體顯性多囊腎病患者尿蛋白譜與疾病進展的相關性研究.pdf

1、研究目的:檢測常染色體顯性多囊腎病(ADPKD)患者的尿液蛋白譜，探究反映腎單位各節(jié)段損傷、腎臟局部炎癥和補體系統(tǒng)活性的尿蛋白指標在ADPKD疾病進程中的變化規(guī)律，同時聯合腎臟的功能指標和結構指標以及PKD基因檢測結果，全面地評估ADPKD的疾病進展，篩選具有臨床指導意義的尿液標志物。
　　研究方法:第一部分研究是一個由8家單位參與的、觀察性橫斷面研究，從2014年3月至2016年8月期間住院或門診隨訪的ADPKD患者中，按照CK

2、D1-5期和男女比例1∶1入組患者。采集病史，記錄實驗室檢查結果，留取空腹清潔中段晨尿標本和空腹血清標本，應用酶聯免疫吸附測定(ELISA)、散射比濁法、透射比濁法，同步檢測血、尿蛋白指標的濃度。采用核磁共振成像技術(MRI)行雙側腎臟平掃并測算總腎體積(TKV)。根據CKD1組的多囊腎病患者一般特征，從健康體檢中心匹配正常人作為對照，男女比例1∶1。研究的尿蛋白共計十種，所有尿蛋白均以尿肌酐值進行標化。腎小球損傷指標:尿白蛋白/肌酐比

3、值(ACR)、尿轉鐵蛋白/肌酐(TRF/Cr)、尿免疫球蛋白G/肌酐(IgG/Cr)，近端腎小管損傷指標:尿腎臟損傷分子/肌酐(KIM-1/Cr)、尿肝臟型脂肪酸結合蛋白/肌酐(L-FABP/Cr)、尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白/肌酐(NGAL/Cr)、尿視黃醇結合蛋白/肌酐(RBP/Cr)、尿α1-微球蛋白/肌酐(α1-MG/Cr)，炎癥指標:尿單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1/Cr)，補體指標:尿補體B因子(CFB/Cr)。<

4、br>　　第二部分和第三部分是單中心、前瞻性、縱向隊列研究，選擇2014年3月至2016年12月我科定期隨訪的ADPKD患者，基線時患者的估算腎小球濾過率eGFR≥15ml/min*1.73m2，以eGFR≥30ml/min*1.73m2為主。每隔半年或1年來院隨訪1次，隨訪內容包括病史采集、體格檢查、一般實驗室檢查、基于MRI的TKV測量、尿液蛋白譜檢測（指標及其檢測方法同第一部分）。第三部分的PKD基因檢測采用的是高通量測序方法。<

5、br>　　結果:第一部分“常染色體顯性多囊腎病患者尿蛋白譜與疾病進展的多中心橫斷面研究”:研究共納入200名ADPKD患者，根據CKD1期患者，匹配了40名健康人作為正常對照。腎小球損傷指標尿ACR、尿IgG/Cr和尿TRF/Cr在疾病早期（CKD1期）就顯著高于正常人(P＜0.01)，尿ACR、尿IgG/Cr在ADPKD患者中，CKD1-2期內整體的漲幅并不大，直到疾病后期（CKD3-5期）才會上升明顯(P＜0.05)，尿TRF/Cr

6、直到CKD4期才明顯上升(P＜0.001)。近端小管損傷指標中，CKD1期患者同正常人相比，尿α1-MG/Cr和尿RBP/Cr無顯著差異，患者組間比較發(fā)現自CKD3期開始，二者尿液濃度開始顯著上升(P＜0.05);患者尿NGAL/Cr高于正常人(P＜0.05)，患者尿L-FABP/Cr在疾病早期與正常人無顯著差異(P＞0.05)，患者中至CKD4-5期，二者顯著上升，但是血清NGAL濃度變化則比較早，在CKD2期時就已明顯上升(P＜0.

7、05);CKD1期患者尿KIM-1/Cr顯著高于正常人，就ADPKD患者而言，隨著CKD的進展，尿KIM-1/Cr逐漸增加，至CKD4期達最高，CKD5期似有回落的趨勢(P＞0.05)。補體指標:CKD1患者的尿CFB/Cr與正常人無異(P＞0.05)，CKD1-3期內，尿CFB/Cr差異不大，濃度均比較低，但是CKD4-5期患者尿CFB/Cr濃度明顯上升(P＜0.001)。炎癥指標:CKD1患者的尿MCP-1/Cr顯著高于正常人(P＜

8、0.05)，患者中隨著eGFR下降，尿MCP-1/Cr逐漸升高(P＜0.001)，血清MCP-1濃度并不隨著疾病進展而變化(P＞0.05)。
　　所有尿蛋白指標均與eGFR呈負相關關系(P＜0.001)。對于早期患者（eGFR≥60ml/min*1.73m2），尿MCP-1/Cr與HtTKV的相關性優(yōu)于其它尿蛋白(r=0.396，P＜0.001)。對CKD1-3期的患者，進一步作多元回歸分析發(fā)現，尿ACR、α1-MG/Cr、MCP

9、-1/Cr與HtTKV是獨立相關的。
　　第二部分“常染色體顯性多囊腎病患者尿蛋白譜與疾病進展的前瞻隊列研究”:該隊列共納入了106名ADPKD患者，中位隨訪時間2.0[1.7-2.2]年，大部分患者的腎功能儲備相對較好。隨訪過程中，ADPKD患者的TKV的平均年變化值為79.4[23.8-148.4]cm3，TKV的平均年變化率(ΔTKV％/year)為5.33％[2.48％-10.65％]，eGFR平均年變化值為-3.2±6.

10、6ml/min*1.73m2，eGFR平均年變化率為-4.2±8.7％。應用ROC曲線分析發(fā)現:除了尿MCP-1和尿CFB之外的所有尿蛋白對基線eGFR＜60ml/min*1.73m2均有診斷價值，以尿α1-MG/Cr的診斷效能最佳，尿L-FABP/Cr次之;基線尿MCP-1/Cr對ΔTKV％/year＞5％和ΔTKV％/year≥6％均有預測作用。經多因素Logistic回歸分析，基線尿MCP-1/Cr是ΔTKV％/year＞5％和Δ

11、TKV％/year≥6％的獨立預測因子。
　　第三部分“常染色體顯性多囊腎病患者尿蛋白譜與基因突變類型的關系”:該隊列共納入93名患者，主要來自第二部分的縱向隊列，中位隨訪時間是2.0[1.8-2.2]年，PKD基因檢測的陽性率是78.5％，20例患者未檢測出致病突變位點，PKD2基因突變、PKD1基因非截短突變和PKD1基因截短突變的比例分別是12.9％、20.4％、45.2％。無ADPKD家族史的患者檢測陰性率略高于有家族史患

12、者(36.8％ vs17.6％，P=0.13)。PKD突變類型并不影響TKV的增長速率(P＞0.05)。PKD1截短突變組患者的尿MCP-1/Cr顯著高于PKD1基因非截短突變組(P＜0.05)。多元分析發(fā)現:患者的年齡與eGFR呈負相關，男性性別、PKD1基因突變（尤其是PKD1截短突變）是eGFR下降的獨立危險因子，在眾多尿蛋白指標中，尿ACR、L-FABP/Cr、KIM-1/Cr與eGFR呈現獨立負相關;以基線HtTKV為因變量，