蒺藜皂苷對代謝綜合征的影響及其有效成分分析.pdf

1、華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文蒺藜皂苷對代謝綜合征的影響及其有效成分分析姓名：牛偉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：瞿偉菁20050601摘要果表明STT對于Ms模型的高脂血癥癥狀具有明顯的改善作用。上述攝食量顯著降低現(xiàn)象，提示必須關(guān)注STT是否存在抑制食欲的副作用，為此本文研究了STT對健康大鼠食欲的影響。每日一次性灌冒給藥，持續(xù)6周，對照組按照lml／kg灌服蒸餾水，STT組按照40mg／kg灌服STT。結(jié)果顯示兩組大鼠食量無顯著性

2、差異，說明在普通飼料飼養(yǎng)條件下，5TT對健康(非肥胖)大鼠無食欲抑制作用。但值得注意的是，STT組中有4只大鼠體重降低或零增長，而另外四只體重增長則均超過10％，提示大鼠對STT的敏感性可能存在較為顯著的個體差異，因此不能排除STT對部分大鼠的食欲和體重有一定影響。本實驗室前期研究曾發(fā)現(xiàn)STT對腫瘤細(xì)胞有～定的促凋亡活性，為了解STT是否對正常肝細(xì)胞也存在細(xì)胞毒作用，研究利用MTT法就STT對正常肝細(xì)胞生氏活性的影響作了初探。結(jié)果表明S

3、TT對正常肝細(xì)胞L02生長的影響并不呈簡單線性關(guān)系，在50一lOOgg／ral范圍內(nèi)出現(xiàn)一定的促進作用，在其他濃度則表現(xiàn)為一定的抑制作用，說明STT對正常細(xì)胞造成的損害相對較小，對人體的毒副作用可能也較小，同時也提示肝細(xì)胞對STT的作用濃度有～定敏感性，可能存在STT的特異受體或特定代謝途徑。明確作用靶點是現(xiàn)代中藥與國際接軌的重要目標(biāo)，為了進一步探明STT的藥理機制，本文利用體外培養(yǎng)的人正常肝細(xì)胞株L02，采用半定量RT—PCR方法從分

4、子水平研究了STT對兩種與脂代謝關(guān)系密切的受體蛋白：過氧化物酶體增殖物激活受體a和低密度脂蛋白受體基因表達的影響。按照一般細(xì)胞培養(yǎng)方法，將細(xì)胞傳代培養(yǎng)于25ml培養(yǎng)瓶中，隨機分為為高中低三個濃度的STT給藥組和對照組，每組3瓶重復(fù)。在STT作用下培養(yǎng)24小時后提取細(xì)胞總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，再利用目的基因的特異性引物進行PCR擴增，然后進行瓊脂糖凝膠電泳，最后利用凝膠成像儀和凝膠分析軟件半定量檢測PCR產(chǎn)物數(shù)量，從而確定目的基因

5、表達水平。研究結(jié)果顯示，STT對肝細(xì)胞LBLR基因的表達沒有影響，LDLR可能不是STT的作用靶點。STT在lOOPg／m]濃度下能夠顯著提高肝細(xì)胞PPARⅡ基因的表達，提示STT很可能是通過提高PPARa基因的表達而發(fā)揮降低血脂，抑制食欲，降低體重等作用的。關(guān)鍵詞；蒺藜皂苷高效液相色譜示差折光檢測器代謝綜合征胰島素抵抗糖耐量異常肥胖高脂飲食高脂血癥游離脂肪酸高密度脂蛋白肝細(xì)胞L02低密度脂蛋白受體過氧化物酶體增殖物激活受體n本項研究由