八氯苯乙烯、多溴聯(lián)苯醚等多鹵代有機(jī)污染物的半抗原合成及免疫分析.pdf

1、隨著環(huán)境污染的日益嚴(yán)重，許多新型的多鹵代有機(jī)污染物不斷被報(bào)道和檢測出來。八氯苯乙烯(OCS)、多溴聯(lián)苯醚(PBDEs)和三（2，3-二溴丙基）異氰酸酯(TBC)都是具有持久性、耐光耐熱、生物累積性的多鹵代有機(jī)污染物，并能對(duì)周邊環(huán)境和人體健康構(gòu)成危害。由于缺乏相應(yīng)的半抗原和抗體，目前對(duì)這三種有機(jī)污染物的檢測分析仍依賴于常規(guī)的儀器分析方法。因此本論文針對(duì)這三種多鹵代有機(jī)污染物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，設(shè)計(jì)與合成了多種半抗原化合物，為后續(xù)的免疫分析奠定了物

2、質(zhì)基礎(chǔ);同時(shí)本文還通過動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)獲取了八氯苯乙烯的多克隆抗體，并建立了能選擇性識(shí)別八氯苯乙烯的酶聯(lián)免疫分析方法。本論文的主要內(nèi)容如下:
　　1.通過對(duì)八氯苯乙烯進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，設(shè)計(jì)了兩條合成路線來合成保留不同特征結(jié)構(gòu)的八氯苯乙烯半抗原。第一條合成路線是以五氯硝基苯為原料，通過還原、重氮化、Sonogashira等多步反應(yīng)，制備了含醇羥基和烯丙基溴的前驅(qū)體化合物4和5，繼而通過對(duì)這兩個(gè)化合物進(jìn)行衍生，得到了保留多氯代苯乙烯基結(jié)構(gòu)的八

3、氯苯乙烯半抗原Os1～Os6;而第二條合成路線是以間硝基苯甲醛為原料，利用親電加成、消除、硝基還原等反應(yīng)，獲得了保留三氯代乙烯基結(jié)構(gòu)的八氯苯乙烯半抗原Os7和Os8。所有的八氯苯乙烯半抗原前驅(qū)體和目標(biāo)化合物，均進(jìn)行了1HNMR、13CNMR和MS表征，并得到了結(jié)構(gòu)確認(rèn)。
　　2.第三章的主要研究內(nèi)容是建立八氯苯乙烯的酶聯(lián)免疫分析方法。作者首先篩選出了三種八氯苯乙烯半抗原，并通過活性酯法制備了人工抗原，然后對(duì)新西蘭大白兔進(jìn)行免疫實(shí)驗(yàn)

4、以獲取相應(yīng)的多克隆抗體;繼而經(jīng)過對(duì)抗體和包被原的篩選以及免疫方法的條件優(yōu)化，最終建立了能選擇性檢測八氯苯乙烯的間接競爭ELISA分析方法。在此基礎(chǔ)上，再利用所建立的酶聯(lián)免疫分析方法，不僅對(duì)不同濃度的八氯苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)液和多種干擾物進(jìn)行了檢測分析，而且對(duì)不同樣品體系的加標(biāo)回收率進(jìn)行了考察，同時(shí)還將回收率結(jié)果與氣相分析進(jìn)行了比較。
　　3.第四章中主要討論了多溴聯(lián)苯醚半抗原的設(shè)計(jì)與合成。作者首先利用親電取代反應(yīng)和重氮化反應(yīng)合成了多種多溴代

5、酚化合物，然后通過Chan-Lam偶聯(lián)反應(yīng)，將多溴代酚與化合物26進(jìn)行偶聯(lián)，得到了相應(yīng)的二苯基醚化合物;再進(jìn)一步通過脫保護(hù)和溴素的親電取代反應(yīng)，制備了含酚羥基的半抗原前驅(qū)體;最后通過Williamson成醚反應(yīng)、水解或氧化等反應(yīng)，獲得了多種含脂肪羧基和不同連接臂的PBDEs半抗原分子。這些PBDEs半抗原都通過了結(jié)構(gòu)表征，而且都很好的保留了多溴聯(lián)苯醚的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
　　4.第五章闡述了TBC半抗原的設(shè)計(jì)與合成。本項(xiàng)研究是通過以2，4

6、，6-三(烯丙氧基)-1，3，5-三嗪為原料，利用Claisen重排反應(yīng)及與NaOH的成鹽反應(yīng)制得了重要中間體化合物33。再通過以2-溴乙酸乙酯(4-溴丁酸乙酯或6-溴己酸乙酯)為原料，經(jīng)過親核取代反應(yīng)、溴化加成及鹽酸的酸性水解反應(yīng)，成功合成了含有脂肪羧基功能基及不同連接臂的TBC半抗原化合物;而含有脂肪氨基的TBC半抗原是通過Gabriel氨基合成法來獲得的。含芳香羧基和芳香胺基的TBC半抗原則是分別以對(duì)羥基苯甲醛、對(duì)羥基苯甲酸叔丁基