黃曲霉毒素B-,1-間接競爭ELISA檢測方法的建立與單克隆抗體免疫親和柱的初步研制.pdf

1、分類號UDC密級編號學(xué)位論文蕙些重垂苤曼】間接壺塋量Ll曼△拴到左選趁建童生望直隆埴簽魚壅苤麴掛盥墊生班趔指導(dǎo)教師姓名盜揚熬援(擅塑直昌盔堂生焦壁金嬰塞瞳申請學(xué)位級別姓專業(yè)名稱邀生塹堂論文提交日期2QQ5生曼且論文答辯日期2QQ量生亙且學(xué)位授予單位和日期直昌盔堂2QQ量生目目答辯委員會主席衄土勤評閱人值勤越勇堡2005年6月謄黃曲霉毒素Bl間接競爭ELISA檢測方法的建立與單克隆抗體免疫親和柱的初步研制摘要黃曲霉毒素B1(Aflatox

2、inB1，AFBl)是由某些真菌菌株產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。由于其具有極強的毒性、致癌性以及在自然界存在的普遍性，許多國家規(guī)定了其在各類糧食、食品和飼料中的限量標準。在食物中要避免AFB，含量超標，除了在農(nóng)作物種植、儲存、加工等各環(huán)節(jié)科學(xué)作業(yè)外，最有效的方法是加強對整個操作環(huán)節(jié)的檢測監(jiān)控，及時發(fā)現(xiàn)和剔除受污染的產(chǎn)品，防止AFBl含量超標的產(chǎn)品進入人類食物鏈。因此研究準確、靈敏、快速的AFB，檢測方法具有重要意義。本研究主要內(nèi)容包括：AFB。

3、人工抗原的制備，AFB，間接競爭ELISA檢測方法的建立，以及AFB。單克隆抗體免疫親和柱的研制。在AFBl人工抗原制各的第一步肟化反應(yīng)中，用室溫肟化法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的加熱回流法，使肟化率達到95％；在第二步EDC法制備AFBl肟化物與載體蛋白的偶聯(lián)物時，采用修飾的牛血清白蛋白(MBSA)，避免了EDC引起的蛋白質(zhì)自身交聯(lián)問題。并在制備過程中通過TLC與ELISA方法對反應(yīng)進行監(jiān)控，確定了最佳的肟化反應(yīng)時間與偶聯(lián)反應(yīng)時間，并就AFB。與MBS