水稻W(wǎng)RKY63基因的克隆及水稻PR1基因誘導(dǎo)表達(dá)的研究.pdf

1、WRKY類蛋白是廣泛存在于植物中的一類轉(zhuǎn)錄因子，參與植物對病原物的防衛(wèi)反應(yīng)、非生物脅迫以及某些生長發(fā)育的生理過程。本研究利用篩庫的方法，從稻瘟菌激發(fā)子處理的水稻懸浮細(xì)胞的基因文庫中分離了全長的WRKY63基因。這個(gè)基因是WRKY家族轉(zhuǎn)錄因子中的新成員，它被推測編碼含有435氨基酸的蛋白質(zhì)。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法，將該基因超表達(dá)后轉(zhuǎn)入煙草，得到轉(zhuǎn)基因植株30個(gè)株系。 病程相關(guān)蛋白(PR蛋白)是植物在防衛(wèi)反應(yīng)過程中誘導(dǎo)產(chǎn)生的一類蛋白，

2、在植物的抗病抗逆過程中發(fā)揮重要作用。本研究利用PCR的方法克隆了水稻PRl基因的啟動(dòng)子，并且將該啟動(dòng)子與GUS報(bào)告基因相連，通過農(nóng)桿菌的介導(dǎo)轉(zhuǎn)入煙草，得到轉(zhuǎn)基因植株28個(gè)株系。利用WRKY89和WRKY63轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)、機(jī)械損傷、紫外照射，植物激素等因素處理轉(zhuǎn)基因煙草，發(fā)現(xiàn)這些因素均不能誘導(dǎo)PRl基因啟動(dòng)子活性發(fā)生顯著變化。結(jié)果表明兩種WRKY蛋白不能調(diào)節(jié)PRl基因在煙草中的表達(dá)；PRl基因的表達(dá)也不受機(jī)械損傷、紫外照射和植物激素等非生