《中國藥典》石榴皮、石榴子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)增修訂研究.pdf

1、石榴皮為石榴科植物石榴Punica granatum L.的干燥果皮，是2015版《中國藥典》科研任務(wù)修訂品種，原收載于《中國藥典》2010年版，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中【含量測定】項下只規(guī)定了石榴皮總鞣質(zhì)含量不得低于10.0％，缺乏特異性和特征性成分的量化指標(biāo)。石榴子（藏文名“賽朱”，()），為石榴科植物石榴Punica granatum L.的干燥成熟種子，是2015版《中國藥典》科研任務(wù)新增品種，原收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)?藏藥》（第一冊），其

2、標(biāo)準(zhǔn)僅有性狀描述，導(dǎo)致石榴子藥材及其復(fù)方制劑缺乏質(zhì)量評價依據(jù)。因此本文對石榴皮、石榴子的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，為石榴皮、石榴子藥材及其復(fù)方制劑的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。
　　目的：
　　1.建立DNA條形碼鑒定石榴皮和石榴子藥材的新方法，鑒定石榴皮、石榴子藥材基原。
　　2.完善中藥石榴皮質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，建立藏藥石榴子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，保證石榴皮、石榴子臨床用藥的有效性和安全性。
　　方法：
　　1.采用MEGA5.1軟件，分

3、析石榴皮、石榴子藥材ITS2、psbA-trnH序列的種內(nèi)變異程度，并且根據(jù)K2P計算其遺傳距離，采用NJ法分別構(gòu)建石榴的ITS2和psbA-trnH序列系統(tǒng)聚類樹。
　　2.采用HPLC法測定石榴皮、石榴子藥材中的鞣花酸含量。
　　3.采用顯微鑒定和TLC鑒別方法鑒別石榴子藥材。
　　4.按2010年版《中國藥典》一部附錄方法測定石榴子藥材的灰分、水分、酸不溶性灰分和浸出物含量。
　　結(jié)果：
　　1.石榴

4、皮、石榴子DNA條形碼鑒定：29批石榴樣本所得的ITS2、psbA-trnH序列與 GeneBank數(shù)據(jù)庫 BlAST序列的相似度達(dá)均達(dá)99%；ITS2序列長度為244bp，種內(nèi)無變異，psbA-trnH序列長度為405~409bp，具有2個單倍型，樣品序列的K2P遺傳距離范圍為0-0.0025，平均K2P遺傳距離為0.0002；從以ITS2、psbA-trnH序列為基礎(chǔ)構(gòu)建的系統(tǒng)聚類樹中可以看出，石榴與外類群能明顯的區(qū)分開，單系性良好

5、。
　　2.石榴皮質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：建立了石榴皮中鞣花酸的HPLC含量測定方法，確定了石榴皮中鞣花酸的含量限度（按干燥品計算，鞣花酸≥0.45%），完善了石榴皮質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　3.石榴子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：確定了石榴子性狀特征和顯微特征；建立了石榴子的薄層鑒別方法；測定了10批石榴子水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物溶物含量，并確定了相應(yīng)的限度要求（水分≤16.0%、總灰分≤4.0%、酸不溶性灰分≤1.0%、浸出物≥42.0%）；建立了石榴子