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1、目的:研究具有活血化瘀抗腫瘤作用的凋膜止崩膏對(duì)子宮內(nèi)膜癌相關(guān)抑癌基因Rb2/p130表達(dá)的改變,探討凋膜止崩膏宮腔應(yīng)用治療子宮內(nèi)膜癌前病變的分子生物學(xué)機(jī)制。
方法:選取30例于2012年9月至2014年9月在陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院門診就診和收入住院同時(shí)符合以下納入標(biāo)準(zhǔn)的患者:臨床表現(xiàn)為陰道不規(guī)則出血,40-52歲之間且無(wú)生育要求,初診行診斷性刮宮,術(shù)后病理診斷為子宮內(nèi)膜不典型增生,除外全身器質(zhì)性病變所致的陰道不規(guī)則出血,近3個(gè)
2、月內(nèi)未服用含性激素類藥物。留取初診時(shí)診刮刮出物作為用藥前子宮內(nèi)膜,診刮后對(duì)以上30例患者進(jìn)行B超監(jiān)測(cè),直至子宮內(nèi)膜厚度超過(guò)1cm且無(wú)陰道出血時(shí),取得患者知情同意并簽署知情同意書后,向?qū)m腔一次性注入滅菌后“凋膜止崩膏”(濃度:9g/ml)3ml,留院觀察48小時(shí)后,若未出現(xiàn)高熱等嚴(yán)重副反應(yīng)則再次行診刮術(shù),刮出物作為用藥后子宮內(nèi)膜。將用藥前、后兩次子宮內(nèi)膜組織分為兩組,即對(duì)照組(用藥前子宮內(nèi)膜)和用藥組(用藥后子宮內(nèi)膜),通過(guò)免疫組化SAB
3、C法、實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(realtime PCR,RT-PCR)及蛋白免疫印跡(Western-blot)法測(cè)定宮腔用藥前后兩組子宮內(nèi)膜組織Rb2/p130的表達(dá)。
結(jié)果:1.免疫組化SABC法結(jié)果顯示:Rb2/p130在兩組的子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)均可見表達(dá),且用藥組中Rb2/p130陽(yáng)性表達(dá)率較對(duì)照組顯著升高。2.RT-PCR結(jié)果示:用藥組中Rb2/p130 mRNA表達(dá)較對(duì)照組明顯升高,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(
4、P<0.05)。3.western-blot結(jié)果示:pRb2/p130表達(dá)量在用藥組中明顯高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:1.宮腔應(yīng)用凋膜止崩膏,通過(guò)促進(jìn)不典型增生內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞中Rb2/p130基因的轉(zhuǎn)錄,上調(diào)該蛋白的表達(dá),限制了具有異型性的腺上皮細(xì)胞過(guò)度增生,從分子水平上降低了其侵襲臨近間質(zhì)組織進(jìn)而發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的風(fēng)險(xiǎn),具有阻止不典型增生發(fā)展為子宮內(nèi)膜癌的作用。2.凋膜止崩膏可作為阻止不典型增生向子宮
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