岷山山系黑熊種群生存力分析及黑熊分子生物學初探.pdf

1、四川農業(yè)大學博士學位論文岷山山系黑熊種群生存力分析及黑熊分子生物學初探姓名：侯萬儒申請學位級別：博士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：任正隆20030501006l：4359只，09200064：4394只，09120073。15在近親繁殖、人類捕捉3％影響下，100年內種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：2161只，099740002；2463只，097940015：2695只，O968003l：2893只，o9560041：2964只

2、，09440：051；3162只，0902006：3229只，0902006；3283只，091240074：3314只，090400793338只，08960079。16在近親繁殖、人類捕捉5％影響下。100年內種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：1704只，09970002；1534只，0982440017；1374只，096340034：1200只，094340047：1028只，09210057；876只，089740073；729

3、只，08730088：607只，O8720058：487只，08560059：389只，08370067。17在近親繁殖、食物欠收和人類捕捉2％影響下，100年內種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：2268只，09970002：2364只，09830014：2958只，09630029：3228只，095640037；3424只，09430049：3603只，09350052；3707只，09260057：3779只，091840036：3

4、825只09080076：3910只，086240077。18在近親繁殖、食物欠收和人類捕捉3％影響下100年內種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：1905只，09970002；2039只，098240015：2142只，0966400302200只，095040042：2247只，09370048：2262只，09370048：2259只，091040065：2245只，08960069；2227只，08860071；2227只，0825

5、008l。19在近親繁殖、食物欠收和人類捕捉5％影響下，100年內種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：1523只，O。997_40002；1301只，09820014；1081只，09580038：981只。09340050：713只，O9160047：555只，08800085；426只，08440116：319只，08190117；230只，08070114：162只，07890109。2黑熊分子生物學初步研究結果：本實驗采用人類x染色

6、體上的15對粗掃描微衛(wèi)星標記(GATAl75D03DXS9896GATAl44D04DXS6800GATAl82E04DXS9900DXS9895DXS6810DXS7132DXSl047DXYSl54DXS6797DX$6789GATAl65812DXSl068)引物和人類SSX、ALTE和IDH3G基因的序列位標(STSXSSX4stSG54512、ALTE—RH38668、IDH3GstSG47410)；J[物對黑熊總基因組(DN

7、A)進行了PCR擴增。15對粗掃描微衛(wèi)星標記中有4對引物能擴增出產物，這4對引物的名稱分別是DXS9900、DXS9895、GATAl82E04和DXYSl54，其中DXS9895、GATAl82E04引物在黑熊中能分別擴增出大小和結構各異的兩個DNA片段。SSX4stSG54512、ALTERH38668、lDH3GstsG47410這3對引物均能在黑熊DNA中擴增出產物。對擴增產物分gⅡ進行聚丙烯酰胺凝膠電泳和銀染，然后從聚丙烯酰胺

8、凝膠電泳膠片上回收DNA，分別進行克隆和測序。通過對擴增產物序列比較分析和Blast檢索發(fā)現(xiàn)：21人類x染色體上這4對微衛(wèi)星標記引物在黑熊中所擴增的6個DNA片段，在性質上不屬于重復序列。這6個DNA片段與相應的標記模式序列相比，一是在長度上存在較大差異；二是在結構上也存在很大差異，即除兩端引物序列同源外，在兩引物之問的序列同源性特別低。這6個DNA片段經Blast檢索，未能找到其片段全序的同源序列。由此初步認為：人類X染色體上的這4對

9、微衛(wèi)星引物在黑熊中所擴增的6個DNA片段具有黑熊特異性，在對黑熊核基因組的認識尚處空白的狀態(tài)下，這6個DNA片段可以作為黑熊的標記序列。這6個序列：序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6可暫時分別命名為BlackbearDXS9900、BlackbearDXS98951、BlackbearDX898952、BlackbearGATAl82E04l、BlackbearG^M182E042和BlackbearDXSl54。22人類S