內(nèi)生真菌Epichlo_ bromicola菌種分離鑒定及其發(fā)酵物對擬南芥幼苗生長的影響.pdf

1、學(xué)校代碼： ! Q 1 2 魚 分類號：——論文題目學(xué)號： 三1 2 Q 墨Q Q 2 編號：——內(nèi)生真菌E p i c h l o b “ b r o m i c o l a 菌種分離鑒定及其發(fā)酵物對擬南芥幼苗生長的影響學(xué) 院：生命科學(xué)學(xué)院專 業(yè)：植物學(xué)研究方向：藥用植物生物技術(shù)姓 名：文先指導(dǎo)教師：陳貴林教授秦路平教授2 0 1 5 年5 月2 0 日內(nèi)生真菌E p i c h l o b “ b r o m i c o l a 菌

2、種分離鑒定及其發(fā)酵物對擬南芥幼苗生長的影響摘要E p i c h l o 孝屬真菌是子囊菌門( A s c o m y c o t a ) 肉座菌目( H y p o c r e a l e s ) 麥角菌科( C l a v i c i p i t a c e a e ) 的一類與冷季型禾草共生的真菌。有研究發(fā)現(xiàn)，從E p i c h l o 孝屬真菌發(fā)酵物中分離所得的化合物主要為生物堿類物質(zhì)，其提高宿主植物抗蟲活性和抗食草動物能力。

3、本研究以薏苡內(nèi)生真菌E p i c h l o d 屬真菌為研究對象，通過分子生物學(xué)方法鑒定其菌種，并分析該菌發(fā)酵物對擬南芥幼苗生長的影響，為揭示內(nèi)生真菌影響植物生長及其機制提供實驗基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：1 ．本研究為了鑒定薏苡( C o i x l a c h r y m a - j o b iL ．v a t ．m a - y u e nS t a p f ) 內(nèi)生真菌—印i c h l o 孝屬的菌種，先提取了D N

4、A 并對其t u b 2 和t e f l 基因序列進行了克隆及系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果顯示，該菌株和E p i c h l o 謄b r o m i c o l a 的親緣關(guān)系最近，且在同一分支上。對其進一步進行同源序列比對分析，發(fā)現(xiàn)克隆所得t e f l 和t u b 2基因序列與E p i c h l o 謄b r o m i c o l a 的t e f l 和t u b 2 序列相似度分別為9 8 ．6 7 ％和9 8 ．8 ％。結(jié)

5、合形態(tài)學(xué)分析，推測本論文所用的菌株為E p i c h l o 害b r o m i c o l a 。2 ．通過大量發(fā)酵E p i c h l o 百b r o m i c o l a ，將所得的發(fā)酵物使用7 5 ％乙醇提取，再用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取，各萃取部位適量加到擬南芥幼苗1 ／2 M S 培養(yǎng)基中，統(tǒng)計對擬南芥幼苗鮮重、擬南芥幼苗干重、擬南芥幼苗葉片數(shù)、擬南芥幼苗不定根數(shù)和擬南芥幼苗主根長等5 個生物量的