孕期BDE209暴露對小鼠胎盤脫碘酶表達(dá)的影響與其發(fā)育神經(jīng)毒性效應(yīng)的關(guān)系和意義初探.pdf

1、多溴聯(lián)苯醚(PBDEs)是一種環(huán)境中廣泛存在的全球性有機污染物，近年來發(fā)現(xiàn)其在孕期婦女胎盤的負(fù)荷水平有逐年增高的趨勢，對胎盤和胚胎發(fā)育具有潛在危害。動物研究顯示PBDEs孕期暴露可導(dǎo)致出生子代發(fā)育神經(jīng)毒性效應(yīng)，主要表現(xiàn)在運動行為和認(rèn)知能力的損傷，作用途徑和機制尚不清楚，但目前認(rèn)為與PBDEs的甲狀腺激素干擾有關(guān)。在哺乳動物的不同組織內(nèi)存在三種脫碘酶(DI-1、2、3)，各自以不同的脫碘方式調(diào)節(jié)局部組織和細(xì)胞內(nèi)甲狀腺素生物活性，并對循環(huán)甲

2、狀腺素水平造成影響。在孕早期，胎兒甲狀腺素完全源于母體，并依賴于胎盤組織中脫碘酶調(diào)節(jié)，以保證胎兒組織器官（包括腦）的正常發(fā)育，而胎盤脫碘酶DI-3在孕期的表達(dá)和活性增高，其主要功能降解從母體循環(huán)轉(zhuǎn)運的高活性的甲狀腺素T4、T3，具有保護胎兒的意義。由于孕期也是胎腦發(fā)育的關(guān)鍵時期，因此可以推測，胎盤DI-3損傷，不僅可誘導(dǎo)胚胎甲狀腺素紊亂，同時可導(dǎo)致腦發(fā)育損傷，造成出生后子代中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的改變，這與PBDEs的甲狀腺素干擾和發(fā)育神經(jīng)毒

3、性效應(yīng)是一致的，但PBDEs對胎盤脫碘酶的作用尚未見報道。
　　目的:明確胎盤DI-3是孕期BDE209暴露的靶點和毒性效應(yīng)指標(biāo);孕期BDE209暴露主要通過胎盤DI-3誘導(dǎo)甲狀腺素干擾，進(jìn)而導(dǎo)致神經(jīng)發(fā)育毒性效應(yīng)的機制途徑。
　　方法:本研究用PBDEs最主要的同系物之一，BDE209，在孕前和孕期用不同劑量(低劑量:1.5mg/kg·d;高劑量:225mg/kg·d)染毒母鼠。在孕20天qRT-PCR檢測小鼠胎盤三種脫碘酶

4、基因表達(dá)特征;在雄性子代小鼠出生后不同階段(30天、60天)分別用化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法（CLEIA）檢測循環(huán)甲狀腺素水平，用Morris水迷宮檢測雄性子鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力，并用qRT-PCR和Western Blot檢測小鼠肝臟和腦海馬組織脫碘酶DI-3的基因和蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:1）孕期BDE209暴露對出生雄性子鼠的生長發(fā)育具有一定影響，使出生子鼠體重降低;2）孕期BDE209暴露，即使在環(huán)境相關(guān)的低劑量下，對出生雄性子鼠的

5、空間學(xué)習(xí)記憶能力具有損傷作用，并具有劑量-效應(yīng)關(guān)系，及隨年齡增長有逐漸加劇的趨勢;3）孕期BDE209暴露可誘導(dǎo)胎盤脫碘酶不同程度的下調(diào)，對DI-3基因表達(dá)尤為顯著，并呈顯著的劑量-反應(yīng)關(guān)系;比較出生雄鼠肝臟和腦DI-3的基因和蛋白表達(dá)，胎盤DI-3的基因表達(dá)與其發(fā)育神經(jīng)毒性效應(yīng)有高度一致的趨勢，表明胎盤DI-3可能是孕期BDE209作用的靶基因和發(fā)育毒性的敏感效應(yīng)指標(biāo);4）孕期BDE209暴露誘導(dǎo)出生雄鼠鼠循環(huán)甲狀腺激素干擾，但隨時間

6、有恢復(fù)正常趨勢，提示其甲狀腺素干擾效應(yīng)可能主要源于胎盤DI-3對胚胎甲狀腺素影響的后期作用，是導(dǎo)致發(fā)育神經(jīng)毒性效應(yīng)的途徑。
　　結(jié)論:孕期PBDEs暴露可能通過胎盤脫碘酶，特別是DI-3，誘導(dǎo)甲狀腺素干擾，進(jìn)而導(dǎo)致發(fā)育神經(jīng)損傷效應(yīng);而胎盤脫碘酶DI-3可能是孕期PBDEs的主要靶點和毒性效應(yīng)指標(biāo)，可用作PBDEs發(fā)育毒性的敏感標(biāo)記物。
　　研究不僅為PBDEs發(fā)育神經(jīng)毒性機制提供了一個新的思路，而且為指導(dǎo)PBDEs人群流行病