直接偶聯(lián)法制備配基密度可控的瓊脂糖層析介質(zhì).pdf

1、疏水層析是廣泛應(yīng)用于生物大分子分離純化的技術(shù)，丁基瓊脂糖(butyl-agarose)層析介質(zhì)、苯基瓊脂糖(Phenyl-agarose)層析介質(zhì)、辛基瓊脂糖(octyl-agarose)層析介質(zhì)是常用的疏水分離介質(zhì)。本文采用直接偶聯(lián)法制備了上述三種瓊脂糖層析介質(zhì)，并考察了其性能。 以國產(chǎn)快流速瓊脂糖凝膠為基質(zhì)，采用直接偶聯(lián)法制備了三種瓊脂糖層析介質(zhì)。考察了直接偶聯(lián)反應(yīng)中催化劑三氟化硼加入量、反應(yīng)時間和反應(yīng)溫度等因素的影響，通過

2、正交實驗和單因素實驗確定瓊脂糖疏水層析介質(zhì)優(yōu)化反應(yīng)條件。丁基瓊脂糖疏水層析介質(zhì)優(yōu)化反應(yīng)條件為：反應(yīng)溫度45℃，反應(yīng)時間45min，催化劑三氟化硼乙醚用量0.02mL/g-gel。在此條件下，控制丁基縮水甘油醚的用量，制備了不同丁基密度的丁基瓊脂糖疏水層析介質(zhì)；苯基瓊脂糖疏水層析介質(zhì)優(yōu)化反應(yīng)條件為：反應(yīng)溫度45℃，反應(yīng)時間30min，催化劑三氟化硼乙醚用量0.01mL/g-gel。在此條件下，控制苯基縮水甘油醚的用量，制備了不同苯基密度的

3、苯基瓊脂糖疏水層析介質(zhì)；辛基瓊脂糖疏水層析介質(zhì)優(yōu)化反應(yīng)條件為：反應(yīng)溫度45℃，反應(yīng)時間15min，催化劑三氟化硼乙醚用量0.02mL/g-gel。在此條件下，控制辛基縮水甘油醚的用量，可制備配基密度可控的辛基瓊脂糖疏水層析介質(zhì)。 考察了研制瓊脂糖層析介質(zhì)的機械穩(wěn)定性、化學穩(wěn)定性和不同配基密度的層析介質(zhì)對牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶(lysozyme)的吸附性能。研制層析介質(zhì)的壓強-流速曲線基本為直線，介質(zhì)在較高壓強下形變很小，