殼聚糖固定化蘆丁降解酶及其應(yīng)用研究.pdf

1、蘆丁降解酶(rutin-degrading enzymes，RDEs)是一種專一性酶，其活性很高，在水溶液中使蘆丁水解生成蕓香糖和槲皮素，在不同的醇溶液中可使蘆丁醇解生產(chǎn)不同的蕓香糖苷。糖類是自然界中存在最為廣泛的生物分子，糖類參與精子與卵子的結(jié)合、胚胎發(fā)育中的細(xì)胞分化以及抗原的產(chǎn)生。此外，寄生性病毒、細(xì)胞和毒素總是先利用多種細(xì)胞表面的糖而緊緊地附著在細(xì)胞表面，然后再進(jìn)入細(xì)胞進(jìn)而破壞細(xì)胞。因而糖類及其衍生物也被看作一類潛在的藥物。烷基糖

2、苷作為新一代表面活性劑，應(yīng)用性能的優(yōu)異是世界公認(rèn)的。隨著化裝品、洗滌劑和表面活性劑的品種向著溫和、綠色、天然方向發(fā)展的趨勢，應(yīng)用生物酶催化法合成此類化合物，由于其高產(chǎn)率、低成本、無污染和簡單易行的特點(diǎn)開始越來越受到人們的重視。 本實(shí)驗(yàn)建立了應(yīng)用殼聚糖固定化蘆丁降解酶的方法，并對其固定化條件進(jìn)行了優(yōu)化。得出固定化酶的最適溫度為40℃，在此條件下得到的固定化蘆丁降解酶相對于等量的游離酶的活性為69.3％。確定了固定化體系的最適pH為

3、6.5，在此條件下得到的固定化蘆丁降解酶相對于等量的游離酶的活性為65.7％。 同時(shí)本實(shí)驗(yàn)對殼聚糖固定化酶的改進(jìn)方法進(jìn)行了研究。通過用不同量的甲醛對殼聚糖上的氨基進(jìn)行不同程度的封閉，發(fā)現(xiàn)隨著殼聚糖氨基封閉程度的加深，固定到殼聚糖上的蘆丁降解酶相對活力呈上升趨勢。 通過使蘆丁降解酶在反應(yīng)過程中固定化，和利用常規(guī)方法固定化蘆丁降解酶活力的比較，發(fā)現(xiàn)蘆丁降解酶在反應(yīng)中固定化比在常規(guī)條件下固定化，酶活力提高了18.8％。本實(shí)驗(yàn)簡