甲殼低聚糖、甲殼低聚糖-硒對THP-1源性巨噬細胞脂質(zhì)轉(zhuǎn)運及抗氧化酶相關(guān)基因表達的影響.pdf

1、目的:
　　一、完善甲殼低聚糖-硒的合成方法,提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和純度。
　　二、研究甲殼低聚糖、甲殼低聚糖-硒對THP-1源性巨噬細胞脂質(zhì)轉(zhuǎn)運及抗氧化酶相關(guān)基因表達的影響。
　　方法:本研究分以下兩部分
　　一、甲殼低聚糖-硒的合成及檢測方法的完善:將甲殼低聚糖與硒絡(luò)合成甲殼低聚糖-硒,對絡(luò)合物進行紫外、紅外光譜檢測,并用紫外分光光度法測定甲殼低聚糖-硒中的硒含量。
　　二、用100ug/ml的甲殼低聚糖及甲

2、殼低聚糖-硒分別處理THP-1源性巨噬細胞6小時、12小時、24小時、48小時,運用半定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)方法檢測其LDL受體、CD36、ABCA1、SR-BI及SOD、GSH-Re、NOS的mRNA的變化。
　　結(jié)果:
　　一、甲殼低聚糖-硒水溶液中不存在游離的硒離子,紫外及紅外檢測說明硒和甲殼低聚糖形成了穩(wěn)定的絡(luò)合物,此絡(luò)合物中含硒元素683.5μg/g。
　　二、甲殼低聚糖各處理時間組與各相應(yīng)對照組比較:LDL

3、受體、CD36的mRNA表達下調(diào)具有顯著性;ABCA1、SR-BI的mRNA表達上調(diào)具有顯著性;SOD、GSH-Re的mRNA表達上調(diào)具有顯著性;NOS在6小時處理組的mRNA表達具有顯著性,超過6小時無表達。
　　三、低聚糖-硒各處理時間組與各相應(yīng)對照組比較:LDL受體、CD36的mRNA表達下調(diào)具有顯著性;ABCA1、SR-BI的mRNA表達上調(diào)具有顯著性;SOD、GSH-Re的mRNA表達上調(diào)具有顯著性;NOS6小時處理組的

4、mRNA表達上調(diào)具有顯著性,超過6小時無表達。將甲殼低聚糖-硒與甲殼低聚糖各相應(yīng)處理時間組比較:LDL受體、CD36、ABCA1、SR-BI的mRNA表達無統(tǒng)計學(xué)學(xué)意義;而SOD、GSH-Re及NOS的6小時處理組的mRNA表達上調(diào)具有顯著性。
　　結(jié)論:
　　一、甲殼低聚糖能與硒形成絡(luò)合物,配位基團主要是氨基,其次羥基也有一定的配位能力。此絡(luò)合物沒有雜質(zhì),甲殼低聚糖的結(jié)構(gòu)沒有因硒的絡(luò)合而受到破壞。
　　二、甲殼低聚糖

5、和甲殼低聚糖-硒均能上調(diào)ABCA1、SR-B1的mRNA表達水平,下調(diào)CD36、LDL受體的mRNA表達水平,二者作用水平相當(dāng)。根據(jù)這些基因表達產(chǎn)物的功能分析,證明二者(主要是甲殼低聚糖成分)有促進膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運作用。
　　三、甲殼低聚糖和甲殼低聚糖-硒均能上調(diào)NOS、GSH-Re和SOD的mRNA表達水平,而甲殼低聚糖-硒比甲殼低聚糖上調(diào)更加明顯。由此說明二者均有較強的抗氧化作用,且甲殼低聚糖-硒抗氧化作用更強,在使用劑量范圍