澤黃顆粒及其拆方對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病腎損傷大鼠的治療效應(yīng)研究.pdf

1、目的:
　　1.驗(yàn)證澤黃顆粒對(duì)高糖高脂飼料聯(lián)合STZ致DM大鼠腎損傷的療效及其機(jī)制。
　　2.探討澤黃顆粒及其拆方（活血利水組份、益氣組份）對(duì)DM大鼠腎臟AQP1和周細(xì)胞相關(guān)蛋白α-SMA表達(dá)的調(diào)節(jié)效應(yīng)。
　　方法:
　　雄性SD大鼠共70只，體重為170-210g，隨機(jī)分成正常組10只，DM模型組60只。正常組喂食普通飼料;DM模型組喂食高糖高脂飼料，在高糖高脂飼料飼養(yǎng)4周后以40mg/kg體重一次性空腹腹腔注

2、射STZ，72h后檢測(cè)血糖，以連續(xù)3次空腹血糖≥16.7mmol/L，尿糖陽(yáng)性，尿微量白蛋白定性測(cè)量陽(yáng)性者確定為DM模型復(fù)制成功，造模成功大鼠48只，再隨機(jī)分為模型組（給予生理鹽水，1次/d，i.g.）10只、澤黃顆粒組（給予澤黃顆粒4.23g/kg，1次/d，i.g.）10只、拆方1組(給予活血利水組份1.08g/kg，1次/d，i.g.）9只、拆方2組(給予益氣組份1.8g/kg，1次/d，i.g.)9只、西藥對(duì)照組（給予鹽酸二甲雙

3、胍片0.5g/kg，1次/d，i.g.）10只。灌胃給藥8周后，用普通光鏡觀察各組大鼠腎組織病理變化，并測(cè)定各組大鼠BG、TG、TC、BUN、HbA1c、Scr及UAER指標(biāo)，采用ELASA法檢測(cè)大鼠尿液中AQP1的濃度，運(yùn)用免疫熒光方法檢測(cè)α-SMA在腎組織的分布情況，并采用Western-blot及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各組大鼠AQP1、α-SMA蛋白和基因在腎臟的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.模型組大鼠均出現(xiàn)出明顯多

4、飲、多食、多尿，一般狀況較差，體重下降，皮毛色澤暗黃，刺毛現(xiàn)象明顯，BG、TG、TC、BUN、HbA1c、Scr、UAER均明顯高于正常組大鼠(P＜0.01)。澤黃顆粒組、拆方1組、拆方2組和西藥對(duì)照組大鼠的TG、TC、BUN、HbA1c、Scr、UAER較模型組均顯著下降（P＜0.05)，其中與西藥對(duì)照組相比，澤黃顆粒組下降更明顯（P＜0.05)。澤黃顆粒組和西藥對(duì)照組大鼠BG較模型組均明顯下降(P＜0.01)，但拆方1組和拆方2組無(wú)

5、明顯變化(P＞0.05)。
　　2.普通光鏡觀察腎組織病理變化顯示，正常組大鼠腎小球的結(jié)構(gòu)清晰，腎間質(zhì)中未見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小管上皮細(xì)胞排列整齊;模型組大鼠腎小球肥大，系膜區(qū)增寬，腎小球內(nèi)可見(jiàn)大量紅細(xì)胞淤積，腎小管上皮細(xì)胞腫脹、脫落，腎間質(zhì)中可見(jiàn)單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn);澤黃顆粒組大鼠腎小球內(nèi)極少見(jiàn)紅細(xì)胞淤積，腎小管上皮細(xì)胞未見(jiàn)脫落，腎間質(zhì)中少見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);拆方1組和拆方2組大鼠腎小球未見(jiàn)肥大，系膜區(qū)未見(jiàn)增寬，腎小球中可見(jiàn)紅細(xì)胞淤

6、積情況，腎小管上皮細(xì)胞有腫脹、脫落;西藥對(duì)照組大鼠腎小球中可見(jiàn)紅細(xì)胞淤積的情況，腎小管上皮細(xì)胞偶見(jiàn)脫落、壞死。
　　3.與模型組相比，澤黃顆粒組、拆方1組、拆方2組大鼠腎臟AQP1蛋白、mRNA表達(dá)水平均明顯升高(P＜0.05)，同時(shí)尿液AQP1濃度均顯著降低（P＜O.05)。
　　4.免疫熒光顯示，正常組大鼠α-SMA蛋白僅表達(dá)于腎組織微血管壁，而在腎小球和腎小管間質(zhì)內(nèi)未見(jiàn)表達(dá);模型組大鼠α-SMA蛋白在腎小球（尤其腎小球

7、血管極）、腎小管、腎間質(zhì)均有表達(dá);澤黃顆粒組、拆方1組、拆方2組和西藥對(duì)照組大鼠α-SMA蛋白在腎小球、腎小管、腎間質(zhì)的表達(dá)均有減少。
　　5.與模型組相比，澤黃顆粒組大鼠α-SMA蛋白、mRNA表達(dá)水平均明顯降低(P＜0.05)，拆方1組、拆方2組大鼠α-SMA mRNA表達(dá)水平也顯著降低（P＜0.05），但α-SMA蛋白表達(dá)水平無(wú)明顯變化(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.澤黃顆?？梢越档虰G，較好地緩解DM大