雌激素上調(diào)三叉神經(jīng)節(jié)谷氨酰胺合成酶表達(dá)及其對(duì)偏頭痛大鼠模型的影響.pdf

1、目的：
　　偏頭痛是一種以中年女性為高發(fā)人群的最常見的原發(fā)性頭痛，中國(guó)成年男女患病率分別為5.9％與12.8%。目前認(rèn)為女性對(duì)偏頭痛的易感性主要與雌激素(主要是雌二醇)的周期性波動(dòng)有關(guān)，然而具體機(jī)制尚不清楚。本研究通過卵巢切除術(shù)建立卵巢去勢(shì)大鼠模型，采用免疫熒光染色法和Western blot法檢測(cè)大鼠三叉神經(jīng)節(jié)（TG）內(nèi)衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酰胺合成酶（GS）及谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體（EAAT-1、EAAT-2）的表達(dá)變化，觀察雌激素對(duì)TG衛(wèi)星

2、膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸代謝的影響。皮下注射硝酸甘油建立偏頭痛大鼠模型,檢測(cè)各組大鼠TG處c-fos的表達(dá)，給予GS抑制劑L-MSO，觀察GS對(duì)偏頭痛大鼠模型的影響。
　　材料與方法：
　　1.成年雌性Wistar大鼠45只，隨機(jī)分成假手術(shù)組（Sham，N=15）、去勢(shì)組（OVX，N=15）、去勢(shì)+雌激素替代（OVX+E，N=15）。
　　2.酶免疫法檢測(cè)各組大鼠血清中雌二醇濃度，驗(yàn)證卵巢去勢(shì)模型是否成功。
　　3.采用W

3、estern blot法和免疫熒光染色法分別檢測(cè)各組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)谷氨酰胺合成酶的表達(dá)及其與衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞激活標(biāo)志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）、谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的共表達(dá)。
　　4.皮下給予硝酸甘油(GTN)建立偏頭痛大鼠模型，給予GS抑制劑或生理鹽水，觀察各組動(dòng)物行為學(xué)變化，采用Western blot法檢測(cè)各組大鼠TG處c-fos的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.與假手術(shù)組相比，卵巢切除術(shù)能顯著降低血清雌二醇水平，給予外源性

4、雌激素能升高血清雌二醇水平（P<0.05）。
　　2.免疫熒光染色和Western blot結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，去勢(shì)組TG衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞GS表達(dá)下調(diào)（P<0.05），給予雌激素替代后GS表達(dá)與假手術(shù)組無明顯差異（P>0.05）。
　　3.動(dòng)物行為學(xué)與Western blot結(jié)果顯示，與皮下注射生理鹽水組相比，皮下注射 GTN能引起大鼠搔頭、舔毛、爬籠等行為學(xué)評(píng)分增高，并能引起大鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元即刻早期基因c-fos表達(dá)

5、增加（P<0.05）。4.卵巢切除或者給予GS抑制劑，能增加硝酸甘油引起的行為學(xué)評(píng)分與三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元c-fos的表達(dá)（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.雌激素上調(diào)三叉神經(jīng)節(jié)衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酰胺合成酶的表達(dá)，提示雌激素可能促進(jìn)三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元-衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞間谷氨酸-谷氨酰胺代謝偶聯(lián)。
　　2.雌激素調(diào)節(jié)偏頭痛大鼠模型中三叉神經(jīng)痛覺傳入神經(jīng)元的激活，提示雌激素可能參與偏頭痛的發(fā)病過程。
　　3.調(diào)節(jié)三叉神經(jīng)節(jié)谷