HSS-1型自由流電泳設(shè)備的研制及其在提取肝細(xì)胞刺激因子上的應(yīng)用.pdf

1、目的 自行研制一臺HSS．1型自由流電泳設(shè)備，并利用該設(shè)備分離提取乳豬肝組織中的肝細(xì)胞刺激因子(HSS)，建立乳豬肝細(xì)胞刺激因子的提取工藝路線。 方法 在自由流電泳技術(shù)工作原理基礎(chǔ)上進(jìn)行技術(shù)改造，采用有機(jī)玻璃、聚乙烯管、微孔濾膜等為主要材料，輔以恒流泵、電泳儀等設(shè)備，自行設(shè)計(jì)和制作一套HSS．1型自由流電泳設(shè)備，用于提取乳豬肝細(xì)胞刺激因子(hepaticstimulatorsubstance，HSS)。

2、 先將乳豬肝組織用超聲破碎法制備肝細(xì)胞裂解液，然后用加熱離心法獲取HSS粗提液。用混合床離子交換樹脂除鹽技術(shù)去除HSS粗提液中的無機(jī)離子，并用QAE葡聚糖A-50層析技術(shù)確定HSS等電點(diǎn)范圍。最后利用HSS．1型自由流電泳設(shè)備分離提取HSS粗提液中的HSS。用MTT活性測定法確定提取物中HSS生物活性；用考馬斯亮藍(lán)蛋白含量測定法確定去除雜蛋白效果，并計(jì)算HSS比活性。 結(jié)果 1．已研制出一臺HSS．1型自由流電

3、泳設(shè)備樣機(jī)。 2．PBS預(yù)處理的離子交換樹脂可安全有效地應(yīng)用于大量HSS粗提液的除鹽過程，除鹽徹底且保留HSS的生物活性。 3．HSS的大致等電點(diǎn)為5．0以下。 4．HSS粗提液經(jīng)該設(shè)備電泳后，其中的HSS總活性沒有降低，比活性明顯升高。 結(jié)論 本實(shí)驗(yàn)建立的乳豬HSS提取工藝方法簡單，HSS粗提液經(jīng)自行設(shè)計(jì)制作的HSS．1型自由流電泳設(shè)備電泳后，HSS總活性沒有降低，比活性明顯提高，說明