金納米探針的電泳分析及其在檢測上的應(yīng)用.pdf

1、金納米粒子具有小尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)、光學(xué)效應(yīng)以及特殊的生物親和效應(yīng)，這些效應(yīng)使得金納米粒子廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、材料學(xué)等領(lǐng)域，目前，金標(biāo)記技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗領(lǐng)域已經(jīng)成為四大標(biāo)記技術(shù)之一。表面結(jié)合了核酸或蛋白質(zhì)的金納米粒子在生物醫(yī)學(xué)方面具有非常廣泛的應(yīng)用，為了更好地應(yīng)用金納米探針，需要對這種金納米探針進(jìn)行分析表征，目前主要是應(yīng)用電鏡技術(shù)，但這種技術(shù)操作比較煩瑣、條件苛刻、儀器昂貴。這就需要發(fā)展一些相對簡單的方法來對金納米探針進(jìn)行分析表征。

2、 本論文引入兩種表面調(diào)控分子巰基己醇(MCH)和4-巰基苯甲酸(MBA)，分別和金納米粒子表面包被的核酸進(jìn)行配體交換反應(yīng)，在金納米粒子表面形成二元單分子層，從而得到了表面含有MBA-DNA和MCH-DNA的金納米粒子，即為我們所制備的金納米探針。用凝膠電泳法、毛細(xì)管電泳法和熒光淬滅法對這種金納米探針進(jìn)行了分析表征。在凝膠電泳表征中，首先通過實驗對凝膠的濃度進(jìn)行了選擇，并分析了金納米粒子的粒徑對分離的影響；在對金納米探針的表征中，不僅分

3、析了表面結(jié)合的DNA的數(shù)量對分離的影響，還詳細(xì)討論了結(jié)合的MCH的數(shù)量和MBA的數(shù)量對分離的影響；對MBA取代DNA和DNA取代MBA進(jìn)行了對比實驗。實驗結(jié)果表明瓊脂糖凝膠電泳分析的最佳濃度是2％；金納米粒子的粒徑越小其電泳遷移率就越大；金納米粒子表面結(jié)合的DNA越多，其遷移率越小；隨著MCH的量的增加，電泳遷移率先減小后增大，但MCH量過大時易使金納米粒子發(fā)生凝聚；隨著MBA的量的增加，電泳遷移率增大，含有MBA的二元單分子層能使金納

4、米粒子穩(wěn)定地分散于水溶液；在對比實驗中發(fā)現(xiàn)DNA取代MBA比MBA取代DNA更容易。在毛細(xì)管電泳表征中，我們實驗所制備的兩種金納米探針(MBA包被的金納米粒子和DNA包被的金納米粒子)以1:1的比例混合后在毛細(xì)管電泳中無法分離，但在毛細(xì)管凝膠電泳中則得到了有效的分離。 本論文發(fā)現(xiàn)金納米粒子在熒光素溶液中可以增強熒光強度。在熒光素溶液中加入低濃度的金納米粒子可以增強熒光素溶液的熒光3-10倍，在氨甲基芘溶液中加入金納米粒子能增強氨