DACH1抑制舌鱗狀細(xì)胞癌生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移的研究.pdf

1、本文對(duì)DACH1抑制舌鱗狀細(xì)胞癌生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移進(jìn)行了研究。本研究分為兩個(gè)部分：
　　第一部分：檢測(cè)腫瘤抑制基因DACH1在人舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)。
　　目的：探討腫瘤抑制基因（Dachshund homolog1，DACH1）在人舌鱗狀細(xì)胞癌（Tongue squamous cell carcinoma，TSCC）中發(fā)揮的作用。
　　方法：收集2011年—2013年青島大學(xué)附屬醫(yī)院51例TSCC住院患者的腫瘤標(biāo)本。患者按照

2、年齡、性別、腫瘤臨床分期、組織類型、分化程度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分類。所有患者術(shù)前均未行放療、化療及其他干預(yù)治療，并同期行頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)。免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)DACH1蛋白在TSCC及對(duì)應(yīng)癌周正常組織中的表達(dá)，并結(jié)合相關(guān)臨床病理參數(shù)進(jìn)行綜合分析。Real time RT-PCR及Western Blot方法檢測(cè)9例新鮮舌鱗癌及癌周正常組織中DACH1表達(dá)情況。
　　結(jié)果：免疫組織化學(xué)結(jié)果表明，約70.6％（36/51）TSCC原發(fā)灶

3、中低表達(dá)DACH1（P＜0.05）；DACH1的低表達(dá)與腫瘤分化差，臨床分期晚及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關(guān)（P＜0.05）。Real time RT-PCR及Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示DACH1mRNA及蛋白質(zhì)在TSCC表達(dá)均低于癌周正常組織（P＜0.01）。
　　結(jié)論：DACH1在TSCC中呈低表達(dá)，DACH1低表達(dá)與腫瘤分化差，臨床分期晚及轉(zhuǎn)移相關(guān)，提示DACH1可能成為TSCC抗腫瘤藥物的治療有效靶點(diǎn)。
　　第二部分

4、：DACH1基因過表達(dá)對(duì)SCC-25細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及侵襲轉(zhuǎn)移的影響。
　　目的：檢測(cè)DACH1基因過表達(dá)對(duì)舌鱗癌SCC-25細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及侵襲轉(zhuǎn)移的影響。
　　方法：Western Blot分別檢測(cè)舌鱗癌細(xì)胞系 CAL-27、Tca8113及 SCC-25中 DACH1的表達(dá)。構(gòu)建慢病毒過表達(dá)載體轉(zhuǎn)染舌鱗癌細(xì)胞株SCC-25，篩選轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組。用 MTT、克隆生成實(shí)驗(yàn)檢測(cè) D

5、ACH1過表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖的影響；Transwell小室及粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DACH1過表達(dá)對(duì)細(xì)胞遷移、侵襲、轉(zhuǎn)移能力的影響；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DACH1過表達(dá)對(duì)細(xì)胞凋亡的作用。
　　結(jié)果：DACH1在SCC-25細(xì)胞中表達(dá)較CAL-27、Tca8113細(xì)胞系顯著降低（P＜0.05），過表達(dá)DACH1于SCC-25細(xì)胞可顯著抑制其增殖活性及克隆形成能力，同時(shí)抑制癌細(xì)侵襲及轉(zhuǎn)移，誘導(dǎo)SCC-25細(xì)胞凋亡，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。<