甲硫氨酸腦啡肽對(duì)小鼠EAE的治療作用及其對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞M1型極化的影響.pdf

1、目的:
　　觀察甲硫氨酸腦啡肽(MENK)對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠模型的治療作用以及對(duì)中樞小膠質(zhì)細(xì)胞M1型極化的影響。
　　研究方法:
　　將小鼠分為EAE組、EAE-PBS組和EAE-MENK組。采用MOG33-35、佐劑CFA、百日咳毒素免疫動(dòng)物建立EAE模型，EAE-MENK組和EAE-PBS組每日腹腔注射10mg/(kg·d)MENK或等量PBS。自小鼠發(fā)病之日起至發(fā)病第8天（發(fā)病高峰期結(jié)束），

2、每日記錄小鼠的體重以及臨床評(píng)分變化。于發(fā)病高峰期頸椎脫位法處死小鼠，多聚甲醛心臟灌注固定，取大腦與脊髓，制作脊髓與腦石蠟切片，行大腦HE染色及LFB髓鞘染色。發(fā)病高峰期提取小鼠腦單核細(xì)胞流式細(xì)胞儀檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞M1型極化情況。
　　結(jié)果:
　　1.MENK的治療作用:小鼠臨床評(píng)分變化: EAE組發(fā)病高峰期臨床評(píng)分3.8±0.9，EAE-PBS組發(fā)病高峰期臨床評(píng)分3.8±1.0，EAE-MENK組發(fā)病高峰期臨床評(píng)分1.4±0.

3、4。EAE-MENK組與其他兩組比較，高峰期臨床評(píng)分分別降低了2.6±0.1(P＜0.05)和2.6±0.3(P＜0.05)，EAE組與EAE-PBS組比較，高峰期臨床評(píng)分無(wú)明顯差異。小鼠體重變化:與EAE-MENK組相比，EAE組發(fā)病高峰期體重下降2.3±0.5g(P＜0.05), EAE-PBS組發(fā)病高峰期體重下降2.2±0.6g(P＜0.05)。EAE組與EAE-PBS組小鼠體重變化幅度大，發(fā)病初期至中期體重下降明顯，EAE-ME

4、NK組小鼠與這兩組相比，體重平穩(wěn)上升，未出現(xiàn)大幅波動(dòng)。病理結(jié)果:HE染色發(fā)現(xiàn)EAE組與EAE-PBS組小鼠大腦實(shí)質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯。EAE-MENK組小鼠大腦實(shí)質(zhì)中炎性細(xì)胞浸潤(rùn)顯著減輕。脊髓LFB髓鞘染色EAE組與EAE-PBS組可見(jiàn)脊髓白質(zhì)疏松，髓鞘不連續(xù)，有大小不等的片狀脫髓鞘區(qū)。EAE-MENK組脊髓髓鞘脫失不明顯。
　　2.MENK對(duì)M1型小膠質(zhì)細(xì)胞極化比例的影響:流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明，與EAE組及EAE-PBS組相比，

5、EAE-MENK組CD40陽(yáng)性M1型小膠質(zhì)細(xì)胞比例分別下降百分之15.13±0.61(P＜0.05)和百分之15.13±0.83(P＜0.05)，CD11c陽(yáng)性M1型小膠質(zhì)細(xì)胞比例分別下降百分之8.03±0.47(P＜0.05)和百分之7.43±1.89(P＜0.05)。由此可見(jiàn)，與EAE組和EAE-PBS組比較，EAE-MENK組中CD40與CD11c標(biāo)記的M1型小膠質(zhì)細(xì)胞的比例均明顯減少。
　　結(jié)論:
　　MENK可明顯