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1、羊毛角蛋白作為一種天然蛋白質(zhì),在生物醫(yī)用材料及組織工程支架材料方面有著廣闊的應(yīng)用前景,而隨著羊毛角蛋白的溶解與制備方法的不同,其生物相容性受到質(zhì)疑。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)羊毛角蛋白的生物相容性研究時(shí)間還較短,評(píng)價(jià)試驗(yàn)也較單一,而本論文所采用的羊毛角蛋白的溶解與制備方法不同于已有的方法與材料。所以本課題將就本專(zhuān)利方法所制備的羊毛角蛋白溶液及羊毛角蛋白膜的生物相容性進(jìn)行評(píng)價(jià)。 本課題通過(guò)羊毛角蛋白的皮膚刺激試驗(yàn)、皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn),來(lái)評(píng)價(jià)羊毛角蛋
2、白對(duì)皮膚的潛在刺激性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在羊毛角蛋白膜的浸提液的皮膚接觸區(qū)無(wú)明顯皮膚刺激反應(yīng),其非極性溶劑浸提液的皮內(nèi)注射點(diǎn)無(wú)紅斑和水腫反應(yīng),其原液和極性溶劑浸提液的皮內(nèi)注射點(diǎn)顯示有不同程度的紅斑和水腫,其原因可能主要來(lái)源于未完全去除的羊毛溶解過(guò)程中使用的活性劑十二烷基硫酸鈉(Sodium dodecyl sulfate,SDS),在后續(xù)的紅外光譜分析中證實(shí)了此雜質(zhì)的存在。 隨后,我們研究了羊毛角蛋白膜在大鼠背部皮下植入后大鼠的體重、活
3、動(dòng)性及組織學(xué)的變化,從而來(lái)評(píng)價(jià)羊毛角蛋白的亞慢性毒性反應(yīng)。在植入羊毛角蛋白膜的兩周觀察期內(nèi),大鼠的活動(dòng)情況良好。植入后一周、兩周的組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)角蛋白膜的皮下植入反應(yīng)符合一般生物相容性材料的組織反應(yīng)過(guò)程,而且沒(méi)有觀察到明顯的組織排斥現(xiàn)象。該試驗(yàn)結(jié)果顯示羊毛角蛋白具有較好的組織相容性。 接下來(lái)我們通過(guò)羊毛角蛋白膜及其生理鹽水浸提液的溶血率的測(cè)定,來(lái)評(píng)價(jià)羊毛角蛋白的血液相容性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)羊毛角蛋白膜及其不同時(shí)間的浸提液的溶血率之間具
4、有顯著性差異,而且隨著浸提時(shí)間的延長(zhǎng),浸提液的溶血率有下降趨勢(shì)。但以上溶血率均遠(yuǎn)大于5%,表明含有過(guò)多SDS的角蛋白膜不宜與血液直接接觸。 最后我們應(yīng)用紅外光譜分析法,對(duì)羊毛角蛋白膜及其浸提后殘余膜的結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)羊毛角蛋白膜的紅外光譜中不但有羊毛纖維的典型吸收峰,還具有SDS雜質(zhì)峰。羊毛角蛋白膜的紅外光譜分析,為其生物安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)的結(jié)果提供數(shù)據(jù)支持和分析依據(jù)。 總之,以上試驗(yàn)證明羊毛角蛋白膜具有較好
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