馬六甲肉食螨的系統(tǒng)地位及遺傳多樣性研究.pdf

1、本論文運(yùn)用分支系統(tǒng)學(xué)方法研究了馬六甲肉食螨在肉食螨亞科中的系統(tǒng)地位，并使用ISSR分子標(biāo)記對(duì)馬六甲肉食螨的居群遺傳多樣性進(jìn)行評(píng)估，分析和探討了其居群遺傳結(jié)構(gòu)和基因流動(dòng)。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果有以下兩個(gè)方面：1馬六甲肉食螨的系統(tǒng)地位基于形態(tài)特征的肉食螨亞科和肉食螨屬支序分析表明：馬六甲肉食螨隸屬的肉食螨屬最先從肉食螨亞科中分離出來(lái)，獨(dú)立形成一支，是該亞科中最原始的類群；根據(jù)支序分析所構(gòu)建的肉食螨屬的兩種支序圖-Mp樹和Nj樹的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)幾乎一致

2、，僅施氏肉食螨的地位較難確定。最早分化出來(lái)的是特氏肉食螨和吐昔肉食螨，馬六甲肉食螨則是肉食螨屬最進(jìn)化的種之一，并與強(qiáng)壯肉食螨以高置信度形成姐妹群，兩者的親緣關(guān)系最近。 2馬六甲肉食螨居群遺傳多樣性分析(1)ISSR-PCR反應(yīng)體系優(yōu)化：通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)方法，建立了ISSR-PCR最佳擴(kuò)增體系-10×PCRbuffer2.5μL、MgCl22μL、TaqDNA聚合酶0.1μL、dNTPs0.5μL、引物1μL、模板4μL、ddH2O1

3、4.9μL。 (2)ISSR-PCR擴(kuò)增結(jié)果：實(shí)驗(yàn)共篩選出13條帶型清晰、穩(wěn)定性好、多態(tài)性高的引物，分別對(duì)廣東廣州(GD)、安徽巢湖(AH)、江蘇泰州(JS)及江西南昌(NC)、九江(JJ)5個(gè)居群進(jìn)行ISSR-PCR擴(kuò)增，產(chǎn)生71條帶，其中65條為多念性條帶，多念性條帶百分比(PPB)達(dá)到91.55％。 (3)遺傳多樣性分析：多態(tài)性條帶百分比PPB、Shannon多樣性指數(shù)I及期望雜合度He對(duì)居群遺傳多樣的評(píng)價(jià)結(jié)果相一

4、致：遺傳多樣性由高到低為NC>GD>JJ>JS>AH，NC居群遺傳多樣性最豐富，AH遺傳多樣性豐富度最低。在物種水平上，觀察等位基因數(shù)Na=1.9155±0.2801，有效等位基因數(shù)Ne=1.5515±0.3402，PPB、I和He的值分別是91.55％、0.3203、0.4783。 (4)居群遺傳結(jié)構(gòu)和基因流：居群間的遺傳分化系數(shù)Gst=0.4021，說(shuō)明大部分的遺傳多樣性分布在居群內(nèi)，與AMOVA分析結(jié)果一致。Nei's無(wú)偏