microRNA-125a和A20在AS患者PBMCs中的表達水平及其臨床意義.pdf

1、目的：比較強直性脊柱炎（AS）患者外周血單個核細胞（PBMCs）中miR-125a、A20的表達水平與健康對照之間的差異，分析miR-125a、A20的表達水平與AS臨床特征及相關(guān)細胞因子之間的關(guān)系，探討miR-125和A20在AS發(fā)病機制中的作用，為AS的診斷、治療及預后提供基礎(chǔ)資料。
　　方法：采用病例對照設計的方法，2014年4月-2015年9月期間，收集AS病例和健康對照各40例。AS病例來自安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院風濕免

2、疫科門診，年齡和性別頻數(shù)匹配的40例健康對照來自合肥市淮河路步行街血站獻血的健康人群。強直性脊柱炎疾病活動度評分（BASDAI）評分≥4的AS患者分在AS穩(wěn)定組，BASDAI評分<4的AS患者分在AS活動組。病例和對照分別采集5ml靜脈血，分離PBMCs，提取RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。使用實時熒光定量聚合酶鏈反應（RT-qPCR）方法檢測AS病例組與對照組PBMCs中miR-125a、A20 mRNA、IL-12mRNA、IL-17mR

3、NA的相對表達水平，每個樣本做3個復孔，比較AS病例組與對照組以及AS穩(wěn)定組與AS活動組之間相關(guān)分子的相對表達水平，并分析miR-125a與A20mRNA之間的相關(guān)性；使用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測病例和對照外周血中相關(guān)細胞因子IL-1、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-β和TNF-a的表達水平，分析miR-125a、A20mRNA等與這些相關(guān)細胞因子之間的相關(guān)性。組間比較統(tǒng)計處理使用的是非參數(shù)檢驗和t檢驗，相關(guān)性分析的

4、統(tǒng)計處理使用的是Spearman等級相關(guān)。
　　結(jié)果：病例組男性29人、女性11人，平均年齡28.10±7.86歲；對照組男性28人、女性12人，平均年齡27.32±7.48歲，兩組年齡和性別比較差異無顯著性。miR-125a在病例組與對照組之間的比較發(fā)現(xiàn)：miR-125a的相對表達水平在病例組與對照組之間差異無統(tǒng)計學意義（Z=0.509, P=0.527）；miR-125a在AS穩(wěn)定組與AS活動組之間的比較發(fā)現(xiàn)：miR-125a

5、在兩組之間的表達沒有差異性（Z=-1.529, P=0.126）；miR-125a相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)；miR-125a與A20 mRNA無相關(guān)性（rs=0.030, P=0.804），但miR-125a與IL-6呈正相關(guān)（rs=0.518, P=0.001）、與IL-10呈正相關(guān)（rs=0.363, P=0.035）、與TNF-α呈正相關(guān)（rs=0.365, P=0.034）；A20表達在病例組與對照組之間的比較發(fā)現(xiàn)：與對照組相比AS病例組

6、A20 mRNA的相對表達水平增加（Z=-3.908, P<0.001），提示A20在AS患者PBMCs中有異常表達；A20在AS穩(wěn)定組與活動組之間的比較發(fā)現(xiàn)：A20在兩組之間的表達差異也沒有達到統(tǒng)計顯著性（Z=0.498, P=0.505）；但A20相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)：A20mRNA水平與CRP呈負相關(guān)（rs=-0.508，P=0.009）、與BASDAI呈負相關(guān)（rs=-0.352, P=0.045），其余各因子之間的相關(guān)性分析均未發(fā)現(xiàn)

7、有統(tǒng)計學的關(guān)聯(lián)（P均>0.05）；相關(guān)細胞因子在AS病例組與對照組之間的比較發(fā)現(xiàn)：IL-12表達病例組顯著高于對照組（Z=-5.04, P<0.001），IL-17表達病例組顯著高于對照組（Z=-2.05, P=0.040），相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)：IL-12與IL-17呈顯著正相關(guān)（rs=0.571, P<0.001）。
　　結(jié)論：未觀察到miR-125a在AS患者PBMCs有異常表達，A20的表達異?？赡茉贏S的發(fā)病機制中起重要作用。