補中益氣湯對TGFβ-3及Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的影響及其治療POP的機制研究.pdf

1、目的：采用細胞分子生物學實驗的方法，研究補中益氣湯對盆腔臟器脫垂的作用機制。通過對比盆腔臟器脫垂患者與正常對照組子宮主骶韌帶中TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA表達情況，明確TGFβ-3、COL1A1、COL3A1能否作為判定相關(guān)治療是否有效的評價指標。并通過體外細胞培養(yǎng)、給藥，檢測分析TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA的表達情況，探討補中益氣湯治療盆腔臟器脫垂的可能機制，以及應(yīng)用補中益氣湯治療盆腔臟器脫

2、垂的可能性，為臨床上補中益氣湯治療盆腔臟器脫垂提供理論依據(jù)。
　　方法：1.選取40例行經(jīng)腹或經(jīng)陰道子宮全切患者，其中符合中、西醫(yī)診斷標準盆腔臟器脫垂患者20例為研究組，非卵巢功能性腫瘤及宮頸上皮內(nèi)瘤變患者20例為正常對照組。術(shù)中取子宮主韌帶、骶韌帶各1cm*1cm，經(jīng)液氮充分研磨后提取組織RNA，實時熒光定量測定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA的表達，并進行統(tǒng)計學分析。2.選取非卵巢功能性腫瘤及宮頸上皮內(nèi)瘤變需

3、行經(jīng)腹子宮全切患者1例，術(shù)中采集子宮骶韌帶約1cm*1cm，進行原代細胞培養(yǎng)，待細胞培養(yǎng)至第4代時，于培養(yǎng)基中加入濃度分別為20g/L、10g/L、5g/L、2.5g/L、1.25g/L、0.625g/L、0.3125g/L的補中益氣湯。每個濃度重復3孔。加藥后第4天取加藥組及對照組細胞，提取cDNA，實時熒光定量測定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA的表達，并進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果：組織RNA檢測結(jié)果：TGF

4、β-3：POP組主骶韌帶中TGFβ-3 mRNA表達水平明顯高于正常對照組；COL1A1：POP組主骶韌帶中COL1A1 mRNA表達水平明顯低于正常對照組；COL3A1：POP組主骶韌帶中COL3A1 mRNA表達水平明顯低于正常對照組。差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。主韌帶組與骶韌帶組TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 mRNA的表達無明顯差異，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。成纖維細胞RNA檢測結(jié)果：給藥后所有濃度TG

5、Fβ-3、COL1A1、COL3A1mRNA的表達均較空白對照組上升明顯，且差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。且隨著濃度的上升，TGFβ-3、COL1A1、COL3A1mRNA的表達亦上升，濃度增加至2.5g/L時，3種因子的表達達峰值。隨著濃度的繼續(xù)升高，3種因子的表達隨之下降，但仍高于空白對照組。且補中益氣湯對TGFβ-3與COL1A1、COL3A1的調(diào)節(jié)作用相似。
　　結(jié)論：1.TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m