蘇云金芽胞桿菌S-層蛋白形成內涵體的研究.pdf

1、細菌S-層，或叫表面層(Surfacelayer)，簡稱S-layer，是古菌和真細菌最普通的表層結構，是由一種單分子的蛋白質亞單元組成的晶狀二維排列。這種變化多樣的最外層結構很好地反映了生物對特殊生態(tài)和環(huán)境條件的適應性。本文圍繞蘇云金芽胞桿菌(Bt)的S-層展開研究，主要結果如下： 1、對前人的研究結論進行了補充，證明了Bt.CTC菌株的S-層基因不僅能在細胞表面表達形成典型的S-層結構，而且還可以在細胞內部累積形成內涵體；該

2、內涵體蛋白編碼基因與CtC2高度同源。 2、CTC菌株芽胞期蛋白聚集體(或稱“內涵體”)實際上并非傳統(tǒng)的伴胞晶體，該蛋白聚集體也并不伴隨著芽胞形成而形成，并證明該蛋白聚集體表面披被一層膜狀結構。該內涵體在基因組成、表面和內部結構上與傳統(tǒng)的伴胞晶體有顯著的不同。在Bt種中，還查明了由S-層蛋白形成內涵體的菌株占總數的22.6％。這些CTC-類似菌株一般不具有生物活性或僅有低生物活性?？傊?，在本室前人結論的基礎上，提出了蘇云金芽胞桿

3、菌種中存在一類新的內涵體蛋白。此結論為Bt種內廣泛存在的無毒菌株提供了一個新的研究思路。 3、在前述結論上，發(fā)現CTC菌株內涵體的穩(wěn)定表達及其降解與培養(yǎng)條件中的溶氧值有關，即與低氧條件有關。在發(fā)酵罐發(fā)酵條件下，應使其發(fā)酵溶氧濃度控制在2.0mg/L。此時，經Westernblot、RT-PCR和質譜測序表明，由S-層形成的內涵體蛋白為基因ctc2的表達產物。 4、基于蘇云金芽胞桿菌野生菌株接收外源質粒比較困難的事實，基本