蘇云金芽胞桿菌S-層蛋白形成內(nèi)涵體的研究.pdf

1、細(xì)菌S-層，或叫表面層(Surfacelayer)，簡稱S-layer，是古菌和真細(xì)菌最普通的表層結(jié)構(gòu)，是由一種單分子的蛋白質(zhì)亞單元組成的晶狀二維排列。這種變化多樣的最外層結(jié)構(gòu)很好地反映了生物對特殊生態(tài)和環(huán)境條件的適應(yīng)性。本文圍繞蘇云金芽胞桿菌(Bt)的S-層展開研究，主要結(jié)果如下： 1、對前人的研究結(jié)論進(jìn)行了補(bǔ)充，證明了Bt.CTC菌株的S-層基因不僅能在細(xì)胞表面表達(dá)形成典型的S-層結(jié)構(gòu)，而且還可以在細(xì)胞內(nèi)部累積形成內(nèi)涵體；該

2、內(nèi)涵體蛋白編碼基因與CtC2高度同源。 2、CTC菌株芽胞期蛋白聚集體(或稱“內(nèi)涵體”)實(shí)際上并非傳統(tǒng)的伴胞晶體，該蛋白聚集體也并不伴隨著芽胞形成而形成，并證明該蛋白聚集體表面披被一層膜狀結(jié)構(gòu)。該內(nèi)涵體在基因組成、表面和內(nèi)部結(jié)構(gòu)上與傳統(tǒng)的伴胞晶體有顯著的不同。在Bt種中，還查明了由S-層蛋白形成內(nèi)涵體的菌株占總數(shù)的22.6％。這些CTC-類似菌株一般不具有生物活性或僅有低生物活性?？傊诒臼仪叭私Y(jié)論的基礎(chǔ)上，提出了蘇云金芽胞桿

3、菌種中存在一類新的內(nèi)涵體蛋白。此結(jié)論為Bt種內(nèi)廣泛存在的無毒菌株提供了一個(gè)新的研究思路。 3、在前述結(jié)論上，發(fā)現(xiàn)CTC菌株內(nèi)涵體的穩(wěn)定表達(dá)及其降解與培養(yǎng)條件中的溶氧值有關(guān)，即與低氧條件有關(guān)。在發(fā)酵罐發(fā)酵條件下，應(yīng)使其發(fā)酵溶氧濃度控制在2.0mg/L。此時(shí)，經(jīng)Westernblot、RT-PCR和質(zhì)譜測序表明，由S-層形成的內(nèi)涵體蛋白為基因ctc2的表達(dá)產(chǎn)物。 4、基于蘇云金芽胞桿菌野生菌株接收外源質(zhì)粒比較困難的事實(shí)，基本